心筋症ハムスター心筋膜異常のジストロフィン結合蛋白質からの解明

从肌营养不良蛋白结合蛋白阐明心肌病仓鼠心肌异常

• 批准号: 06770044
• 负责人: 岩田 裕子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770044/
• 关键词: 心筋症; 心筋症ハムスター; ジストロフィン-ジストロフィン結合蛋白; 精製; 膜異常; 免疫沈降; mRNA; 細胞骨格系タンパク質

心筋症ハムスター心筋壊死の一因としてジストロフィン結合蛋白質50K DAPの細胞膜欠損によるジストロフィン-DAP複合体形成異常の存在をみつけてきたが同様の異常がこの動物の骨格筋においても存在する事を明らかにした。しかし、この動物の死因は呼吸筋マヒでなく心不全であるためジストロフィン複合体に心筋と骨格筋とで差がある可能性が示唆された。そこでハムスター心筋を用いて心筋ジストロフィン複合体の精製を試みた。既報の骨格筋からの精製法すなわちミクロゾーム分画からジストロフィン複合体を界面活性剤であるジギトニンで可溶化するという方法はミクロゾーム分画からのジストロフィンの可溶化がSDSでしかできない心筋には適用できず、新たにジギトニン存在下に心筋をホモゲナイズするという方法で可溶化に成功した。レクチンカラムと抗体カラムを使う二段階で精製した。精製標品のジストロフィン複合体の主な構成成分に骨格筋と心筋とで大差ないが収量が骨格筋の約10倍であった。このことは心筋の収縮弛緩の際の膜の裏打ちにジストロフィン複合体が重要な働きを担っていることを示唆した。今後、この心筋ジストロフィン複合体を用いて各構成成分に対する抗体を作成し心筋症ハムスター心筋における発言を調べるとともに、心筋特有の構成成分の有無を検討していくつもりである。心筋症ハムスター筋細胞膜からの50K DAPの欠損の原因を調べるため遺伝子レベルからの解析をも行っているがmRNAの量及びサイズは正常とかわらず転写以後の異常の存在が示唆された。

A cause of cardiac muscle death is the presence of abnormalities in the formation of a 50K DAP binding protein complex in the skeletal muscle of animals. The cause of death of the animal is respiratory failure, heart failure, heart failure, and bone failure. The purification of the complex was studied. It is reported that the purification method of bone tendon is successful in the solubilization of the interfacial active agent of the complex. The second stage of purification is carried out by the antibody. The main components of the refined standard compound are about 10 times as large as the core tendon. The membrane complex is important for the relaxation of the muscle. In the future, the use of the heart muscle complex in the composition of the antibody to create a heart muscle disease, heart muscle expression, heart muscle specific components of the presence of the discussion. The reason for the deficiency of 50K DAP in cardiac muscle cell membrane is to adjust the mRNA content and protein content of the cell membrane from normal to abnormal.