ヒト血管内皮細胞、平滑筋細胞のCa^<2+>動態およびPGI_2産生に及ぼすMgの影響

Mg对人血管内皮细胞和平滑肌细胞Ca^2+动力学和PGI_2产生的影响

• 批准号: 05770455
• 负责人: 清水 寛正
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770455/
• 关键词: 血管内皮細胞; 血管平滑筋細胞; マグネシウム; 細胞内カルシウム; プロスタサイクリン

1、ヒト臍帯動脈から得られた培養血管内皮細胞(HUVEC)、ラット大動脈から単離、培養した血管平滑筋細胞(SMC)を用いて、低Mg液、正Mg液、高Mg液の各Mg濃度条件のHepes buffer(MgSO_4;0・1・2mM)中に産出されるPGI_2量を、その最終安定産物である6-keto-PGF1alphaをRIA法にて測定することにより定量化した。PGI_2産出量は、保生液のMg濃度を変化させるだけでは変化はみられなかった。しかし、HUVECにPGI_2産生刺激因子であるアラキドン酸20muMを添加すると高Mg時には、正Mg時に比べ、60%の産生増加が認められた。またSMCにアラキドン酸20muM、ノルアドレナリン10^<-6>Mを添加すると、高Mg時には正Mg時に比べ各々100%、30%の産生増加が認められた。2、上記各Mg濃度条件下でのSMC細胞内Ca^<2+>濃度を、細胞内蛍光色素であるFura-2を用いて分光光度計にて測定した。SMC内Ca^<2+>濃度は、低Mg液、正Mg液、高Mg液中ではそれぞれ280nM・136nM・84nMzで、Mg欠乏状態では細胞内Ca^<2+>濃度が増加することが示された。またSMCにアンギオテンシンIIを10^<-7>Mを添加すると、高Mg液中では正Mg液中に比べ細胞内Ca^<2+>濃度の一過性上昇度合いは50%に抑制された。細胞外Mg濃度は血管平滑筋細胞の細胞内Ca^<2+>濃度に影響を及ぼしており、また刺激物質によるCa^<2+>上昇にも影響し、さらに生理活性物質産生能にも影響することが明らかになった。このことから細胞外Mg濃度は血管のトーヌスの調節に密接に関与している可能性が、培養細胞レベルでも示された。

1. Youdaoplaceholder0 umbilical artery ら ら られた cultured vascular endothelial cells (HUVEC), ラット large artery ら単 ら単 isolated, cultured た た vascular smoothing tendon cells (SMC)を used ヒト て, low Mg solution, positive Mg solution, high Mg solution <s:1> under each Mg concentration condition <e:1> Hepes buffer(MgSO_4; 0, 1, 2 mm) に output さ れ る PGI_2 を, そ の ultimate product stability で あ る 6 - keto - PGF1alpha を RIA method に て determination す る こ と に よ り quantitative し た. The output of PGI_2 させるだけで and the concentration of the preservative <s:1> Mg を change させるだけで させるだけで change <e:1> みられな った った. し か し, HUVEC に PGI_2 produce stimulating factor で あ る ア ラ キ ド ン acid 20 mum を add す る と high Mg に は, positive Mg に than べ, 60% の raised plus が め ら れ た. ま た SMC に ア ラ キ ド ン acid 20 mum, ノ ル ア ド レ ナ リ ン 10 ^ < - > 6 M を add す る と and high Mg に は positive Mg べ に ratio of 100%, 30% の 々 have raised plus が recognize め ら れ た. 2. Under the above Mg concentration conditions, the concentration of Ca^<2+> in で SMC cells を and the intracellular 蛍 photopigment であるFura-2を were determined by using a て て spectrophotometer にて to determine the た. SMC in Ca ^ は > < 2 + concentration, lower fluid, is Mg Mg fluid, the fluid of the high Mg で は そ れ ぞ れ 280 nm, 136 nm, 84 NMZ で, Mg owe lack で は intracellular Ca ^ > < 2 + concentration が raised す る こ と が shown さ れ た. ま た SMC に ア ン ギ オ テ ン シ ン II を 10 ^ 7 < - > M を add す る と and high Mg in で は is Mg fluid に than べ intracellular Ca ^ 2 + < > concentration の transient ascendant degree い は 50% に inhibit さ れ た. Extracellular Mg concentration は vascular smooth muscle cell の intracellular Ca ^ 2 + > < に concentration を and ぼ し て お り, ま た stimulus material に よ る Ca ^ 2 + > < rose に も influence し, さ ら に physiological active substances can produce に も influence す る こ と が Ming ら か に な っ た. こ の こ と か ら extracellular Mg concentration は vascular の ト ー ヌ ス の adjust に contact に masato and し て い が る possibility, culture cell レ ベ ル で も shown さ れ た.