人drebrin E基因转染细胞神经再生功能分析-猫眼课题宝

人drebrin E基因转染细胞神经再生功能分析

批准号：

05771040

负责人：

戸田正博

金额：

$0.58万

依托单位：

Keio University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

财政年份：

1993

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

1993 至 --

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771040/

关键词：

ドレブリン神経再生遺伝子導入アクチン結合蛋白質

项目摘要

项目成果

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英文摘要

我々はすでにヒト胎児脳cDNA-lambdagt11ライブラリー(Clontec Labs,CA)より、human drebrin EcDNAを単離し、全塩基配列を決定した。そこで今回、得られたhuman drebrin EcDNAをbetaアクチンプロモーターを有するpMIW-HEPのEcoR V siteおよびmetallotionein-Iプロモーターを有するpMITID13SのHind III siteに挿入した。この発現ベクターをneomycineresistant geneであるpSTB-neoと共に、燐酸カルシウム共沈法に従い、Lcellにco-transfectした。G418によりselectionを行い、ドレブリンE遺伝子導入細胞をcloningしてtransformantを得た。そこで今後、非神経細胞であるLcellに対する、ドレブリンEのもつ神経突起形成作用、アクチンやチュブリン等の細胞骨格蛋白質との相互作用を、ドレブリンAの機能との比較を中心に検討する予定である。抗ドレブリン抗体(M2F6),NBD-phallacidin抗体、抗チュブリン抗体を用いた免疫染色、Western blot解析により、細胞の形態変化およびそれぞれの蛋白発現量の変化を解析する。一方、antisense human drebrinE発現ベクター(pMTID13S/Hind III site)を作製し、pSTB-neoと共にSH-SY5Y cellにco-transfectし、antisense drebrin E transfectantを得た.さらに上記と同様に、その細胞形態変化および蛋白発現量の変化を解析する予定である.

期刊论文(1)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

Masahiro Toda: "Molecular clouing of cDNA encoding human drebrin E and chromosomal mapping of its gene." Biochemical and Biophysical Reseach Communications. 196. 468-472 (1993)

Masahiro Toda：“编码人 Drebrin E 的 cDNA 的分子克隆及其基因的染色体图谱。”

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

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