受容体を介した平滑筋収縮におけるCa^<2+>感受性増強機構およびその調節物質の解明

受体介导的平滑肌收缩中Ca^2+敏感性增强机制及其调节因子的阐明

基本信息

批准号：
05771992
负责人：
佐藤光利
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Toho University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

家兎血管平滑筋を用いてalpha_<1->アドレナリン受容体サブタイプ(alpha_<1A>およびalpha_<1B>)を介した収縮におけるCa^<2+>感受性増加機構を明らかにした。1.beta-escin処理スキンドファイバー標本を用いた実験ノルエピネフリン(NE;10muM)によるCa^<2+>収縮増強作用は、選択的ミオシン軽鎖キナーゼ阻害薬のKT5926(500nM)により抑制された。一方、クロロエチルクロニジン処理標本(alpha_<1A>-受容体のみが存在する標本)におけるNEのCa^<2+>収縮増強作用およびクロニジン(Clon;100muM)のCa^<2+>収縮増強作用はKT5926によって影響を受けなかった。また、KT5926存在下におけるNEのCa^<2+>収縮増強作用およびClonのCa^<2+>収縮増強作用との間には有意な差がなかった。さらに、これらのCa^<2+>収縮増強作用は非水解性GDPアナログのGDPbeta-Sおよび低分子量G-蛋白質(rho蛋白質)をADPリボシル化して不活性化するClostridium botulinumの菌外毒素であるC_35mug/ml処理により抑制された。また、プロテインキナーゼ阻害薬のH-7(20muM)によっても抑制された。2.プロテインキナーゼC活性の測定NEおよびClonによってプロテインキナーゼCは活性化(translocation)された。しかし、この活性の上昇はC_3処理によって影響を受けなかった。これらの結果より、NEはalpha_<1A>-およびalpha_<1B>-受容体サブタイプを介してミオシン軽鎖のリン酸化に依存しない経路とミオシン軽鎖のリン酸化に依存した経路の両方を活性化して収縮に対するCa^<2+>感受性増加を起こすのに対し、Clonは主にalpha_<1A>-受容体サブタイプを介してミオシン軽鎖のリン酸化に依存しない経路を活性化して収縮に対するCa^<2+>感受性増加を起こしていることを明らかにした。さらにこれらのCa^<2+>感受性増加の機序にCキナーゼ-低分子量G-蛋白質を介した経路が存在することを示唆した。

兔血管平滑肌用于揭示通过alpha_ <1->肾上腺素能受体亚型（alpha_ <1A>和alpha_ <1b>）提高Ca^<2+>敏感性的机制。 1。使用β-霉素治疗的皮肤纤维的实验性去甲肾上腺素（NE; 10 MUM）标本Ca^<2+>收缩 - 收缩增强效应（NE; 10 MUM）被选择性肌球蛋白光链链链链酶抑制剂KT5926（500 nm）抑制。另一方面，NE的Ca^<2+>收缩增强作用以及Ca^<2+> Ca^<2+> Ca^<2+> Ca^<2+> Ca^<2+> Ca^<2+> Ca^<2+> Ca^<2+> Ca^<2+> Ca^<2+>可乐定（克隆； 100 Mum）在氯乙基氯苯治疗的标本中（仅存在Alpha__ <1a> -Receptor的标本），而不是由KT592受影响。此外，在KT5926存在的情况下，NE的Ca^<2+增强作用与Ca^<2+>增强效应之间没有显着差异。此外，这些CA^<2+>收缩增强作用被C_35MUG/ML抑制，C_35MUG/ML是肉毒梭菌的细菌外毒素，从而通过低分子gdpbeta-s和低分子量GDPBETA和低分子量G-protein（Rho protein）通过ADPROBOSOSYLATION来灭活非热溶解GDP GDP GDP GDP GDP AMALIOG GDP。蛋白激酶抑制剂H-7（20 MUM）也抑制了它。 2。蛋白激酶C活性蛋白激酶C的测量通过NE和Clon易位。但是，活动的增加不受C_3治疗的影响。这些结果表明，NE激活了通过alpha_ <1a> - - - α_<1b> - 肌动物亚型的肌球蛋白光链独立的途径，从而导致Ca^<2+>敏感性增加，对磷酸化的phosection clon <1通过磷酸化的phosection <1通过磷酸化的途径<1 <1。增加Ca^<2+>对收缩的敏感性。此外，有人提出C激酶 - 低分子量G蛋白介导的途径存在于提高Ca^<2+>敏感性的机制。