両生類胚のアクチビンとレチノインさんの共同作用による分化に関する免疫組織化学的研究

激活素和视黄酸联合作用对两栖动物胚胎分化的免疫组织化学研究

• 批准号: 05780551
• 负责人: 内山 英穂
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780551/
• 关键词: アフリカツメガエル; 中胚葉誘導; アクチビン; フォリスタチン; レチノイン酸; レセプター; 免疫組織化学; 抗体

ツメガエル・アクチビンAおよびアクチビンB、ツメガエル・フォリスタチンについては、親水性の部域を検討して、アクチビンについてはC末端近く、フォリスタチンについては中央部分で13〜15merのペプチドを化学合成した。これをBSAにコンジュケードしてウサギ抗血清を得て、ペプチドカラムにより抗体を精製した。ツメガエル卵をPFAにより固定して免疫電顕を行ったところ、卵黄顆粒に有意な金コロイドのシグナルが検出された。動物極側、植物極側、背側、腹側でシグナルの密度に大きな差異は見られなかった。これらのシグナルはペプチドによる吸収で消えた。このことは、ツメガエル卵においては、アクチビンとフォリスタチンが卵黄顆粒に存在する可能性を示す。一方、東京大学・浅島研究室の福井らとの共同研究で、ツメガエルの初期胚のHPLCフラクションのEDF活性を測定したところ、3つのピークをもつEDF活性が検出され、リテンションタイムから考えて、ツメガエル初期胚にはアクチビンA,AB,Bの3種類が全て含まれるものと考えられた。また、それらを大きく上回るフォリスタチンの存在が福井より示された。ツメガエル・レチノイン酸レセプターalphaに対するペプチド抗体も作成された。クリオスタット切片で抗原の局所を調べたとこら、胚全体の核にシグナルが検出され、原腸期の神経外胚葉、陥入した中胚葉部域にやや強いシグナルが見られた。こららの結果から、母性誘導因子、あるいはそのレセプターであるアクチビンとレチノイン酸レセプターは、発生のごく初期の段階ではっきりとした局在をもとものではなく、卵全体に広がって存在していることが考えられる。

ツ メ ガ エ ル · ア ク チ ビ ン A お よ び ア ク チ ビ ン B, ツ メ ガ エ ル · フ ォ リ ス タ チ ン に つ い て は, hydrophilic の domain を beg し 検 て, ア ク チ ビ ン に つ い て は C terminal near く, フ ォ リ ス タ チ ン に つ い て は central part で 13 ~ 15 killing の ペ プ チ ド を chemical synthesis し た. こ れ を BSA に コ ン ジ ュ ケ ー ド し て ウ サ ギ antiserum を て, ペ プ チ ド カ ラ ム に よ り antibody を refined し た. ツ メ ガ エ ル eggs を PFA に よ り fixed し て immune electric 顕 を line っ た と こ ろ, yolk granules に considering な コ ロ イ ド の シ グ ナ ル が 検 out さ れ た. The differences in the に に and <s:1> densities of the polar side of animals, the polar side of plants, the dorsal side, and the ventral side are found in られな った った. Youdaoplaceholder2 れら シグナ シグナ シグナ ペプチドによる ペプチドによる ペプチドによる suction で disinfection えた. こ の こ と は, ツ メ ガ エ ル eggs に お い て は, ア ク チ ビ ン と フ ォ リ ス タ チ ン が yolk granules exist に す る possibility を す. A laboratory, university of Tokyo, shallow island の fukui ら と で の studies together, ツ メ ガ エ ル の early embryo の HPLC フ ラ ク シ ョ ン の を EDF activity determination し た と こ ろ, 3 つ の ピ ー ク を も つ EDF active が 検 out さ れ, リ テ ン シ ョ ン タ イ ム か ら exam え て, ツ メ ガ エ ル early embryo に は ア ク チ ビ ン A, AB, B の 3 kinds The full name of が is て, including まれる と, と. Youdaoplaceholder0, それらを large く く last time るフォリスタチ <e:1> また exist が Fukui よ show された. Youdaoplaceholder5 is made by the reaction of メガエ に · レチノ レチノ <s:1> acid レセプタ メガエ alphaに against するペプチド antibody メガエ. ク リ オ ス タ ッ ト slice で antigen の bureau を adjustable べ た と こ ら, embryo all の に シ グ ナ ル が 検 out さ れ archenteron stage の 経 god, leaf, 陥 into embryonic し た mesoderm department domain に や や strong い シ グ ナ ル が see ら れ た. こ ら ら の results か ら, maternal induced factor, あ る い は そ の レ セ プ タ ー で あ る ア ク チ ビ ン と レ チ ノ イ ン acid レ セ プ タ ー は, 発 の ご く early の Duan Jie で は っ き り と し た bureau in を も と も の で は な く, egg all に hiroo が っ て exist し て い る こ と が exam え ら れ る.

项目成果

福井彰雅ら: "Indentification of activins A,AB and follistation proteins in Xenopnsembyos" Developmental Biology. (in press). (1994)

Akimasa Fukui 等人：“Xenopnsembyos 中激活素 A、AB 和卵泡蛋白的鉴定”发育生物学（出版中）。

福井彰雅ら: "Isolation and charasterization of Xenopus follistation and activins" Developmental Biology. 159. 131-139 (1993)

Akimasa Fukui 等人：“非洲爪蟾卵泡和激活素的分离和表征”发育生物学 159. 131-139 (1993)