ユウレイボヤにおける中胚葉誘導の分子メカニズムの解析

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私の研究はユウレイボヤにおける胚発生に必要な遺伝子のネットワークを明らかにすることが目的である。2004年の研究ではまずユウレイボヤのすべての転写因子の発現を解析した。ユウレイボヤEST解析により得られたクローンとゲノム配列より予測した遺伝子に基づきスクリーニングで単離したものあわせて389個の転写因子についてすべてin situ hybridization法により受精卵から後期尾芽胚までの発現を調べた。この数はユウレイボヤのすべての転写因子をほぼ網羅する。これらの転写因子の発現パターンはその写真とともにデーターベース化しインターネットで見られるようになっている(http://ghost.zool.kyoto-u.ac.jp/tfst.html)。今年度はこれらの転写因子のうち、原腸胚期までに発現する72個の転写因子についてその機能を阻害するモルフォリノオリゴを作成した。次に、それぞれのモルフォリノオリゴを顕微注入した機能阻害胚における遺伝子の発現をreal time PCR法により調べた。初期原腸胚期に発現するすべての転写因子と後期原腸胚期に発現する転写因子の一部についてその発現量をモルフォリノオリゴ顕微注入胚とコントロール胚とで比較した。また、どの組織での遺伝子の発現が影響されているのかin situ hybridization法により確認した。この情報に基づき、遺伝子ネットワーク図を各割球ごとに作成し、ウェブサイトに掲載した。