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エルシニア菌のスーパー抗原性外毒素の精製、性質及び構造-機能相関に関する研究

耶尔森菌超抗原外毒素的纯化、性质及构效关系研究

基本信息

批准号：
05857033
负责人：
秋山徹
金额：
$ 0.51万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

Yersinia pseudotuberculosis感染症(エルシニア感染症)の臨床症状は、毒素性ショック症候群、猩紅熱等のスーパー抗原性外毒素により引き起こされる疾患の臨床症状とよく類似する。そのため、エルシニア感染症での生体の異常反応にはエルシニア菌が産出するスーパー抗原性外毒素が重要な役割を果たしている可能性が考えられた。この点を明らかにするため解析を行い、以下の成果を得た。1.想定されたスーパー抗原性外毒素の精製を試みた。ヒト末梢リンパ球に対するマイトジェン活性を指標としてカラムクロマトグラフィーおよび新たに導入したHPLCシステムにより精製を進めた結果、SDS-PAGE上で分子量約21kDaのタンパク質を単一標品として精製する事に成功した。2.本タンパク質の性質を検討した。本タンパク質のヒトリンパ球に対するマイトジェン活性のT細胞依存性およびMHCクラスII分子要求性等の生物学的な性質から、我々が精製したタンパク質はスーパー抗原としての特徴を有することを明らかにした。3.精製タンパク質により活性化されるT細胞のTCRVbetaレパートリーを解析した。RT-PCR法による分析の結果、Vbeta3、9、13.1、13.2を持つT細胞が活性化されており、本タンパク質はスーパー抗原性外毒素ある事が証明された。以上の成果に基づき、現在本毒素タンパク質遺伝子をクローニングすることを試みている。

The clinical symptoms of Yersinia pseudotuberculosis infection are similar to those of toxic syndrome, scarlet fever and other antigenic exotoxins. The possibility of producing an antigenic exotoxin in an organism with an abnormal response to an infectious disease is examined. The following results were obtained from the analysis of the results. 1. To determine the antigenic exotoxins As a result of the purification process, a standard product with a molecular weight of about 21kDa was successfully purified on SDS-PAGE. 2. The nature of the substance is discussed. The biological properties of the protein, such as the T cell dependence of the protein activity and the MHC II molecular requirement, are described below. 3. TCRV beta analysis of purified and activated T cells The results of RT-PCR analysis, Vbeta3, 9, 13.1, 13.2 and Vbeta3, 9, 13.1, 13.2 demonstrated that T cells were activated, and Vbeta3, 9, 13.1, 13.2 demonstrated that Vbeta3, 9, 13.1, 13.2 and Vbeta 3, 9, 13.1, 13.2 demonstrated that Vbeta 3, 9, 13.1, 13.2 and Vbeta 3, 9, 13.1, 13.2 demonstrated that Vbeta 3, 9, 13.1, 13.2 and Vbeta 3 were activated. The above results show that the toxin is now in the middle of a chemical reaction.