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動物蛋白質の植物塊根、塊茎での特異的発現に関する研究

动物蛋白在植物根、块茎中特异性表达的研究

基本信息

批准号：
05857259
负责人：
井上誠
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

動物蛋白質を植物塊根、塊茎に特異的に発現させ、目的とする蛋白質を大量に容易に得る方法の確立をめざして研究を進めた。本年度は特にプロトプラスとから植物体の再生、培養系での塊形成の方法を確立させ、塊茎での蛋白質の同定を目的とした。そこで、まず、CaMVプロモーター、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ遺伝子、NOS poly(A)を組み込んだプラスミッド(pCaMVCAT)のCAT上流に各種の長さのパタチンン遺伝子上流のシグナル配列をつなぎ合わせたベクターを作成した。プロトプラストは無菌的にMurashige-skoog培地で育種した植物体の幼葉より、1%セルラーゼ(オノズカR-10)/0.5% Macerozym(オノズカ)/10mMCaCl2/0.42Mしょ糖/V-KM培地で調製した。調製したプロトプラストにプラスミッドをエレクトロポレーション法で導入した。プロトプラストからの植物体の再生は、まず、プロトプラスト用培地で培養後、インドール酢酸10muMを含有するLS培地でカルスを誘導後、10%ショ糖、インドール酢酸1muM,ベンジルアデニン10muMを含有するLS培地で葉茎分化培地に移し、その後、10%ショ糖、0.1muMインドール酢酸含有LS培地で生育させたのち、鉢上げした。結果は、これらの方法ではイモは形成されなかった。そして、植物体の各組織におけるCAT遺伝子の発現を測定したところ、カルス、葉茎培養後の葉、茎、さらに、根分化後の根において、同様な発現がみられたが、組織の特異的発現は観察されなかった。

The development and purpose of animal protein in plant roots and tubers are easy to establish. This year, we have established methods for plant regeneration and mass formation, and for protein identification of tubers. CaMV, CaMV. In the sterile Murashige-skoog culture, the young leaves of the plant are cultivated, 1% Macerozym(R-10)/0.5% Macerozym(R-10)/10mM CaCl2/0.42M sucrose/V-KM culture. The method of adjusting the position of the head is introduced. The regeneration of plant body from the plant was induced by culture medium containing 10muM of citric acid, 10% of sucrose, 1muM of citric acid, 10muM of citric acid, 10% of sucrose, 0.1 muM of citric acid, 10% of sucrose, 0.1 muM of citric acid, 10muM of citric acid, 10% of sucrose, 0.1 muM of citric acid, 10 muM of citric acid. As a result, the method of production was changed. The development of CAT gene in various tissues of plant body was measured in leaves, stems and roots after leaf and stem culture, and the development of CAT gene in different tissues was observed in different tissues.