悪性神経膠腫における構造改変したα型血小板由来増殖因子受容体遺伝子発現の関与

结构修饰的α型血小板源性生长因子受体基因表达参与恶性胶质瘤

• 批准号: 06771057
• 负责人: 隈部 俊宏
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771057/
• 关键词: α-PDGF Receptor; Molignant Glioma; Gene; Genomic Organization; Oncogenesity; Mutation; Gene Amplification; Overexpression

1.正常α-Platelet-derived frowth factor(PDGF)receptor遺伝子構造とpromoter領域の解析α-PDGF receptorの正常遺伝子構造を明らかにした。本遺伝子は全長65kbにおよぶ大きな遺伝子で、23個のexonを有し、翻訳開始地点が第2exonに存在していた。S1mapping,primer extension法による解析では転写開始地点が複数認められた。luciferase assayにてpromoter活性を測定したところ、転写開始地点の上流約200bpのあたりにpositive regulatory elementsが存在した。2.変異型α-PDGF receptorの造腫瘍性の検定(in vitro)細胞外ドメインの一部を欠失した変異型α-PDGF receptorが腫瘍形成に関わっているか否かを調べるため、NIH3T3 cellにこの遺伝子を導入しfocus formation assayを行った。この結果、変異型レセプター遺伝子を導入した細胞のみでfocusが認められた。soft agar assayにて造腫瘍性を検証中である。3.トランスジェニックマウスの作製我々がcloningしたhuman α-PDGF receptor本来のpromoterによってdriveされる正常ならびに変異型α-PDGF receptorのtransgeneを構築し、transgenic mouseを作製中である。さらに、導入遺伝子を脳に強く発現させるため、mouse myelin basic proteinおよびglial fibrillary acidic proteinのpromoterを連結したtransgeneもそれぞれ構築し、transgenic mouseの作製にとりかかった。

1. Analysis of normal α-Platelet-derived fifth factor(PDGF)receptor gene structure and promoter domain This gene is 65kb in length, 23 exons in length and 2 exons in length. S1mapping,primer extension method Luciferase assay promoter activity was measured approximately 200bp upstream of the start site and positive regulatory elements were present. 2. The differential α-PDGF receptor in vitro is a part of the extracellular domain and is involved in tumor formation. NIH 3T3 cell is involved in the introduction of the differential α-PDGF receptor into the focus formation assay. The results of this study are as follows: 1. soft agar assay 3. Cloning of human α-PDGF receptor promoter and construction of α-PDGF receptor transgene and transgenic mouse. In addition, the introduction of genetically modified proteins has been strongly demonstrated, and the construction of transgenic proteins and the creation of transgenic mice have been established to link mouse myelin basic protein and glial fibrillary acidic protein promoters.

项目成果

Kumabe,T.et al.: "Overexpression and amplification of alfa-PDGF receptor gene lacking exons coding for a portion of the extracellular" Tohoku J.Exp.Med.168. 265-269 (1992)

Kumabe,T.et al.：“缺乏编码细胞外部分外显子的 alfa-PDGF 受体基因的过度表达和扩增”Tohoku J.Exp.Med.168。

Kumabe,T.et al.: "Amplification of α-platelet-derived growth factor receptor gene lacking an exon coding fora portion of the extracellula" Oncogene. 7. 627-633 (1992)

Kumabe，T.等人：“缺少编码细胞外部分的外显子的α-血小板衍生生长因子受体基因的扩增”Oncogene，7. 627-633 (1992)。