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構造改変したα型血小板由来増殖因子受容体遺伝子の機能解析

结构修饰α型血小板源性生长因子受体基因的功能分析

基本信息

批准号：
07771077
负责人：
隈部俊宏
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

α型血小板由来増殖因子受容体(PDGFRA)の転写調節領域を含めての全遺伝子構造を解明し、転写活性に関しての検討も終了した。この内容は“Structure, organization and transcription units of the human α-platelet-derived growth factor receptor gene"(Genomics 30:224-232, 1995)に詳細を報告した。さらに、培養細胞に遺伝子導入し、構造改変したPDGFRAの生物学的意義を検討した。in vitro phosphorylation assayにて、構造改変したPDGFRAはリガンドの非存在下で高レベルの燐酸化能を示した。この結果は、構造改変したPDGFRAが制御されない高いチロシンキナーゼ活性を介して、神経膠芽腫形成に関与していることを証明する。これらの結果をもとに、トランスジェニックマウスの作成を行った。先に明らかにしたPDGFRAの転写調節領域を変異型PDGFRA cDNAに接続した遺伝子を導入したトランスジェニックマウスでは、肺及び胎盤での強い発現が見られたが、目的とする脳での強い発現は見られなかった。現在、グリア細胞での強い発現を得ることを目的として、マウスglial fibrillary acidic protein遺伝子の転写調節領域を用いた導入遺伝子を構築し、トランスジェニックマウスを作成している。またin vitroにて、遺伝子導入した培養細胞が造腫瘍能を持つか否かを、soft agar assay及びnude mouseの皮下、脳内移植モデルを検討している。

The regulatory domain of platelet-derived factor receptor alpha (PDGFRA) includes the complete gene structure, and the regulatory activity of PDGFRA is discussed. The content of this article is "Structure, organization and transcription units of the human α-platelet-derived growth factor receptor gene"(Genomics 30:224-232, 1995). The biological significance of gene transfer, structural modification and PDGFRA in cultured cells is discussed. In vitro phosphorylation assay, structural modification of PDGFRA is demonstrated in the absence of high phosphorylation energy. These results demonstrate that structural changes in PDGFRA control the growth and development of collagen. The results of this study are as follows: PDGFRA gene expression regulatory domain is different from PDGFRA gene expression regulatory domain. PDGFRA gene expression regulatory domain is different from PDGFRA gene expression regulatory domain and PDGFRA gene expression regulatory domain. Now, the expression of glial fibrillary acidic protein gene in cells can be constructed by introducing glial fibrillary acidic protein gene into cells. In vitro, gene transfer, cell culture, tumor formation, soft agar assay, and subcutaneous and subcutaneous mouse transplantation were investigated.