構造改変したα型血小板由来増殖因子受容体遺伝子の機能解析

结构修饰α型血小板源性生长因子受体基因的功能分析

• 批准号: 08771051
• 负责人: 隈部 俊宏
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771051/
• 关键词: platelet-derived rrowth factor; receptor; promotor; transgenic mouse; glial; fibrillary acidic protein; glioblastoma; p53

1)ヌードマウスを用いた造腫瘍性能の検討変異型および正常型α型血小板由来増殖因子受容体(α型PDGFレセプター、αPDGFR)を導入したNIH3T3細胞を樹立して、ヌードマウスの皮下に移植したところ、3カ月後に腫瘍の形成を認めた。2)αPDGFRトランスジェニックマウスの検討正常型および変異型αPDGFRをグリアに発現させた2種類のトランスジェニックマウスを複数系統作製した。<変異型αPDGFR発現マウス>4匹のトランスジェニックマウス(F0)を得て、それぞれ系統樹立に成功した。このうち2系統のマウスで脳に変異型レセプターmRNAが発現していることを確認した。明らかな表現形を示すものは出現しなかった。脳の組織学的検討にて、αPDGFRの発現領域にほぼ完全に一致して、胎生期グリア細胞のマーカーであるA2B5、galctocerebroside、ビメンチン陽性を示す領域が存在した。<正常型αPDGFR発現マウス>13匹のトランスジェニックマウス(F0)を得た。このうち、生後7カ月頃よりけいれんと思われる病的症状を示すマウスが1匹現れた。組織学的検討を行っている。3)p53ノックアウトマウスとαPDGFRトランスジェニックマウスの交配p53ノックアウトマウス(ヘテロ)と、正常型および変異型αPDGFR発現マウス(ノザンで確認済み)との交配を行い、数匹のf1を得た。遺伝子解析(サザン)を行ったところ、p53遺伝子に変異(ヘテロ)を持ち、かつ変異型αPDGFR遺伝子も組み込まれたマウスを雌雄1匹ずつ得ることができた。現在、これらをかけ合わせ、p53欠失-変異型αPDGFR発現マウスを作製している。4)αPDGFRの機能解析変異型αPDGFRが細胞膜上で2量体を形成するのかどうか、CHO細胞、COS細胞のstable transfectantを用いて実験を行っている。

1) The expression of PDGF receptor α and PDGFR α was introduced into NIH 3T3 cells and the tumor formation was observed after 3 months of subcutaneous transplantation. 2)αPDGFR is generated from 2 types of αPDGFR. <p><p> The expression of mRNA in the two systems was confirmed. The appearance of the light shows that the light is not visible. Histological examination of the tumor showed that the expression domain of αPDGFR was completely consistent, and the expression domain of A2B5, galctoside, and β PDGFR positive cells existed in the fetal stage. <Normal αPDGFR development>13 p.m.<Normal α PDGFR development> 13 p.m. 7 months after birth, the symptoms of the disease appear. Histological studies are conducted in the laboratory. 3)p53 P53-P54-P53-P54-P55-P54-P55-P55-P5 Now, we're going to have to do something about it. 4) Functional analysis of αPDGFR is different. αPDGFR is formed on the cell membrane of CHO cells and COS cells.

项目成果

Kumabe T, et al: "Overexpression and amplification of α-Platelet Derived Growth Factor Rceptor gene lacking exons coding for a portion of the extracellular region in a malingnant glioma. supplement." Brain Pathology. 4. 417- (1994)

Kumabe T 等人：“恶性神经胶质瘤中缺乏编码部分细胞外区域的 α-血小板衍生生长因子受体基因的过度表达和扩增。《脑病理学》4. 417- (1994)。

Kumade T, et al: "Amplification of α-platelet-derived growth factor receptor gene lacking an exous coding for a portion of the extracellular region in a primary brain tumor of glial origin." Oncogene. 7. 627-633 (1992)

Kumade T 等人：“α-血小板衍生生长因子受体基因的扩增，缺乏神经胶质来源的原发性脑肿瘤中部分细胞外区域的外源编码。”7. 627-633 (1992)。

Kumade T, et al: "Overexpression and amplification of α-PDGF receptor gene lacking exons coding for a portion of the extracellular region in a malingnant glioma." Tohoku J. Exp. Med.168. 265-269 (1992)

Kumade T 等人：“在恶性神经胶质瘤中缺乏编码部分细胞外区域的 α-PDGF 受体基因的过度表达和扩增”（Tohoku J. Exp. 265-269）。

Kawagishi J, et al: "Structure, organization and transcription units of the human α-platelet-derived growth factor receptor gene." Genomics. 30. 224-232 (1995)

Kawagishi J 等人：“人类 α-血小板衍生生长因子受体基因的结构、组织和转录单位。” 基因组学 30. 224-232 (1995)