ツメガエル胚動物半球における背腹軸決定と中胚葉分化の分子機構

非洲爪蟾胚胎动物半球背腹轴确定和中胚层分化的分子机制

• 批准号: 06780619
• 负责人: 木下 圭
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780619/
• 关键词: アフリカツメガエル; 中胚葉誘導; アクチビン; 背腹軸; 8細胞期; 動物半球; リチウム; goosecoid

申請者はこれまでに8細胞期のツメガエル動物半球分離割球のアクチビン応答能に背腹の差があることを報告しており、この応答能の勾配が体軸の決定に関与していると考えている。これを形成する分子の実態は明らかでないが、昨年度の研究で、割球間の勾配は塩化リチウムによる背側化処理で変更しうる可塑的な現象であることがわかっていた。8細胞期分離割球を用いたアッセイは、通常のアニマルキャップアッセイでは不可能な、予定中胚葉領域の解析を行いうることに特徴がある。本年度は、分離割球をアクチビンと塩化リチウムで処理し、背腹の分子マーカー(筋actin,gsc,Xbra,Xwnt-8)の発現がどのように変化するかを調べた。第一の結果は、動物半球の割球をリチウムで処理しただけで背側(原口背唇部)のマーカーであるgscが著しく発現したことである。通常のアニマルキャップアッセイでは、gscはアクチビンによる誘導によって発現し、リチウムでは誘導されない。この結果は、予定中胚葉細胞においてgscが背側化に応答して発現することを示唆している。これが事実であるなら、従来中胚葉誘導作用によって発現するとされいたgscは、アクチビンのもつ背側化の作用によって引き起こすされていた可能性が考えられる。第二の結果は、動物半球の割球で分化する中胚葉の種類が、アクチビンの濃度のみならず処理の時期に応じて変化することである。MBT以前に処理すると背側中胚葉が、それ以降では腹側中胚葉が優先的に分化した。この実験では全く同じ細胞集団でのgsc,Xwnt-8,Xbraの発現量の変化が調べられ、単なる「応答能の喪失」では説明できない、MBT以前での積極的な背側化が示された。以上の結果は、胚においてアクチビンが初期の背側決定因子として機能しうること、及び背腹軸決定に誘導のタイミングが関与していることを示唆している。

The applicant shall report the difference between 8-cell phase and 8-cell phase of animal hemisphere separation ball, and determine the alignment axis of animal hemisphere separation ball. The molecular state of the formation of this phenomenon is clear, and the study of the past year shows that the interaction between the cutting balls and the back side of the treatment is more plastic. 8. Cell stage separation of the ball is not possible, usually not possible, and the analysis of the predetermined mesoderm field is not possible. This year, we have adjusted the development of molecular molecules (actin,gsc,Xbra,Xwnt-8) in the back of the brain. The first result is that the animal hemisphere's cutting ball is not processed. The back side (original mouth back lip) is not processed. In general, it's not easy to find a way to get rid of it. The results showed that the dorsal transformation of mesoderm cells was not obvious. The possibility of embryo induction in the future is examined. The second result is that the type of mesoderm, the concentration of mesoderm and the time of treatment in animal hemisphere are different. The dorsal mesoderm is preferentially differentiated by the descending ventral mesoderm. The change in the amount of gsc,Xwnt-8,Xbra present in the whole cell set indicates that there is a positive dorsal shift before MBT. These results indicate that the dorsal determinants of the early stage and the dorsal ventral axis determinants of the early stage are related to each other.

项目成果

Kinoshita,Kei: "Effect of activin and Lithium on isolated Xenopus animal blastomeres and respouse alteration at the midblastula transition." Development. 121(印刷中). (1995)

Kinoshita, Kei：“激活素和锂对分离的非洲爪蟾动物卵裂球和中囊胚转变的休眠改变的影响”（1995 年出版）。

Kinoshita,Kei: "Onset of competence to respond to activin A in isolated eight-cell stage Xenopus animal blastomers." Development,Growth and Differentiation. 37(印刷中). (1995)

Kinoshita, Kei：“分离的八细胞阶段非洲爪蟾动物卵裂细胞对激活素 A 的反应能力”，《发育、生长和分化》（1995 年出版）。