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マウスのインターロイキン8遺伝子のクローニング

小鼠白细胞介素8基因的克隆

基本信息

批准号：
06770179
负责人：
石川淳
金额：
$ 0.58万
依托单位：
国立予防衛生研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770179/
关键词：
インターロイキン8

项目摘要

マウスにおけるIL-8の遺伝子のクローニングによって明らかにすることを目的とした。1.^<32>PでラベルしたヒトおよびイヌIL-8遺伝子断片をプローブとして用い、制限酵素EcoRIで切断したマウス染色体DNAに対してサザンハイブリダイゼーションを行ったところ、ヒトIL-8遺伝子にホモロジーのある断片(3.0kb)が検出された。2.一方、ヒト、イヌ、ブタおよびウサギIL-8遺伝子塩基配列の比較から、最もホモロジーの高い部分に対するPCR用プライマーを3対作成した。3.上のプライマーを用いて、マウス染色体DNAに対してPCRを行った。4.増幅された断片を^<32>Pでラベルし、マウス染色体に対しサザンハイブリダイゼーションを行ったが、1.で検出されたバンドと一致するものは検出されなかった。5.そこで、1.検出されたバンドをゲルから切り出し、E.coliにクローニングした。6.得られたクローンの塩基配列を決定したが、ヒト、イヌ、ブタおよびウサギIL-8のいずれともホモロジーは認められなかった

マウスにおけるIL-8の伝子のクローニングによって明らかにすることをpurposeとした. 1.^<32>P でラベルしたヒトおよびイヌIL-8 genetic fragment をプローブとして and restriction enzyme EcoRI cut chromosome D of したマウスNAに対してサザンハイブリダイゼーションを行ったところ、ヒトI Fragment of L-8's remaining child, にホモロジーのある(3.0kb)が検出された. 2. Comparison of the alignment of one, one, one, and one of the three IL-8 subtypesら、The highest part of the もホモロジーの高いに対するPCR is made of プライマーを3対. 3. Use いて and マウスchromosome DNA に対してPCRを行った on the のプライマーを. 4. Increased width of the fragment を^<32>P でラベルし, マウスchromosome に対しサザンハイブリダイゼーションを行ったが, 1.で検出されたバンドと unanimously するものは検出されなかった. 5.そこで, 1.検出されたバンドをゲルから车り出し, E.coli にクローニングした. 6. The basic arrangement of the られたクローンの桩base is determined by られたクローンの塩base arrangementをdeterminationしたが、ヒト、イヌ、ブタおよびウサギIL-8のいずれともホモロジーは知められなかった