心筋虚血再潅流障害における細胞内プロテアーゼの役割
细胞内蛋白酶在心肌缺血再灌注损伤中的作用
基本信息
- 批准号:06770492
- 负责人:
- 金额:$ 0.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
心筋は、短時間の虚血後再潅流により、壊死には至らないが一過性の収縮不全を示す(stunned myocardium)。現在まで、stunned myocardiumの収縮不全は、収縮機構のCaに対する反応性の低下によること、虚血再潅流時のCaオーバーロードが重要な役割を担うことが明らかにされてきた。我々は、プロテアーゼ阻害剤の投与によりstunningが軽減されることにより、虚血再潅流時のCaオーバーロードによりCa依存性プロテアーゼが活性化され収縮蛋白に変化が生じるとの仮説をたてた。平成5年度奨励研究の援助により、60分虚血再潅流心より精製したmyofibrilを蛋白電気泳動法で解析し、Zバンドの構成蛋白の一つであるα-actininが減少していること、また、desmin、spectrinにも同様の変化があることが明らかとなった。そこで、本研究では、stunned myocardiumにおいてこれらの構造蛋白に変化があるか否か、その変化と収縮不全との関連性について検討した。モルモット摘出潅流心を用い、15分のglobal ischemia後再潅流してstunned myocardiumのモデルを作成した。血行動態計測後、心臓を-80℃に急速凍結し、α-actinin、desmin、spectrinに対する抗体を用い免疫組織学的手法により検討した。非虚血コントロール心では、α-actininはZバンドに、desminはZバンド及び介在板に、spectrinはZバンド及び細胞膜に染色性を示した。stunned myocaridumでは、心筋の一部にこれらの抗体で染色されない部分が存在し、その領域はいずれの抗体の染色でも一致していた。この染色性低下域の面積と再潅流後の発生圧の回復率との関係を非虚血コントロール心、15分虚血及び20虚血再潅流心で調べたところ、両者の間には良好な相関関係が認められた。この非染色域は、15分虚血後再潅流しなかった心筋では認められず、また、Caを含まない液で再潅流した場合にも認めなかった。また、プロテアーゼ阻害剤leupeptinの投与により、染色性低下域の面積が縮小され、その程度に応じてstunningが軽減された。以上より、stunned myocardiumでは、心筋の一部でZバンド周辺の構造蛋白に変化が生じており、収縮不全の一因と考えられること、この変化には、再潅流時のCaオーバーロードに伴う細胞内プロテアーゼの活性化が関与する可能性が示唆された。
The heart muscle is short and the blood is weak and then flows out. The heart muscle is short and the blood is weak. Now, the contraction of stunned myocardium is incomplete, the contraction mechanism of Ca is low, the deficiency of Ca is low, and the deficiency of blood is important. I want to be able to activate the Ca-dependent protein in the presence of the inhibitor. In 2005, we conducted research on the reduction of α-actin in protein electrophoresis and protein purification. This study was conducted to investigate the correlation between structural protein and protein in stunned myocardium. After 15 minutes of global ischemia, the fluid is removed and the fluid is removed. After hemodynamics measurement, the heart was rapidly frozen at-80℃, α-actin, desmin, and spectrin were detected by immunohistochemical methods. Non-empty blood cells, α-actin, desmin, and medium, spectrin, and cell membrane staining Stunned myocaridium, part of the heart muscle, part of the antibody staining, part of the antibody staining The correlation between the area of the chromatin lowering region and the recovery rate of the blood pressure after reperfusion was good. The color of the non-staining domain is 15 minutes, and then the blood flows again. The area of the chromogenic domain is reduced and the degree of retardation is reduced. The above, stunned myocardium, a part of the heart muscle, structural protein transformation of the Z-ring edge, a cause of incomplete contraction, a cause of this transformation, and a possibility of intracellular activation of Ca + during re-circulation are shown.
项目成果
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