Signaltransduktionswege bei der Apoptose in Hydra

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14-3-3-Proteine sind abundante, ubiquitär verbreitete und sehr konservierte Proteine. Sie sind sowohl in Signalketten involviert, die Apoptose oder Zell-Survival steuern, als auch in solche, die metabolischen Stress verarbeiten können. Ziel dieses Antrages ist es, in Hydra Proteine zu finden, die mit 14-3-3 interagieren. Es liegt nahe, daß dabei 14-3-3-TargetProteine gefunden werden, die wichtige Funktionen in der Signaltransduktion, in der Apoptose oder unter Bedingungen von metabolischem Stress ausüben. Wir haben in Hydra bereits zwei 14-3-3-Homologe identifiziert. Wir werden sie vollständig sequenzieren und ihr Expressionsmuster untersuchen. Anschließend werden beide 14-3-3-Proteine in E.coli exprimiert und markiert, so daß sie als Sonden benutzt werden können, um in Hydra 14-3-3-bindende Proteine zu finden. In einem zweiten Ansatz werden die Hydra 14-3-3-Proteine als Bait in einem Yeast-twoHybrid-Screen eingesetzt. Mit Hilfe dieser Ansätze erwarten wir die Identifikation von 14-3-3-Interaktionspartnern in Hydra und dadurch eine Aufklärung von Signaltransduktionswegen, die metabolischen Stress (Hunger) mit Apoptose verbinden. (p)