歯髄細胞から象牙芽細胞への誘導機構に関する分子生物学的研究

牙髓细胞向成牙本质细胞诱导机制的分子生物学研究

• 批准号: 07771756
• 负责人: 柴 秀樹
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771756/
• 关键词: 歯髄細胞; 象牙芽細胞; 成長因子; TGF-β; オステオネクチン; mRNA

歯髄細胞の象牙芽細胞への誘導機構を解明するために,成長因子(TGF-β,PDGF-AB,bFGF,EGF,IL-1β,TNF-α)が歯髄細胞のオステオネクチン産生に及ぼす影響についてヒト歯髄細胞培養系を用いて検討し,以下の結果を得た。(1)[^3H]サイミジンの細胞への取り込みによって細胞増殖能を調べた結果,TGF-βは歯髄細胞のDNA合成を濃度依存的に促進した。(2)マウス抗ウシオステオネクチンモノクロナル抗体を用い,サンドイッチELISA法により歯髄細胞のオステオネクチン産生に及ぼすTGF-βの影響を分析した結果,TGF-βは著しくオステオネクチン産生を増加させた。さらに,オステオネクチンのウェスタンブロットでは,オステオネクチンは38kDa付近に発現し,TGF-βによって著しく増加し,ELISAから得た増加に一致していた。(3)ウシオステオネクチンのcDNAをプローブとしてオステオネクチンのmRNAをノーザンブロット法によって分析した結果,TGF-βによってmRNA(major band, 2.2kb; faint band, 3.3kb)は増加していたけれども,蛋白レベルでの増加ほど多くなかった。(4)PDGF-AB,bFGF,EGF,IL-1βおよびTNF-αはオステオネクチンの産生を減少させた。以上,TGF-βは歯髄細胞の増殖を促進し,オステオネクチンの発現を翻訳の前段階および後段階で調節し増加させることが明らかとなった。さらにin vivoについて考察するとcondensed dental mesenchymeのような未分化な細胞は増殖能が高く,一方象牙芽細胞は増殖能が低いこと,さらにオステオネクチンは未分化な細胞には認められないが,象牙芽細胞には発現していることから,TGF-βは未分化な歯髄細胞に作用して増殖を高めるのに対して,分化した象牙芽細胞に対しては,オステオネクチンの産生を増加させ象牙質形成に関与していることが考えられた。このように,TGF-βは歯髄細胞から象牙芽細胞の誘導に重要な役割を担っている因子であることが示唆された。

歯 marrow cells の ivory bud へ の induced institutional を interpret す る た め に, growth factor (TGF - beta, PDGF - AB, bFGF and EGF, IL - 1 beta, TNF alpha) が 歯 marrow cells の オ ス テ オ ネ ク チ ン に and ぼ す influence に つ い て ヒ ト 歯 marrow cell culture system を with い て 検 for し, the result of the following の を た. (1) [^ 3 h] サ イ ミ ジ ン の cells へ の take り 込 み に よ っ て cells raised colonization to を べ た results, TGF - beta は 歯 の marrow cell DNA synthesis を concentration dependent に promote し た. Resistance (2) マ ウ ス ウ シ オ ス テ オ ネ ク チ ン モ ノ ク ロ ナ を use い ル antibody, サ ン ド イ ッ チ ELISA method に よ り 歯 marrow cells の オ ス テ オ ネ ク チ ン に and ぼ す TGF - beta の influence を し た results, TGF - beta は the し く オ ス テ オ ネ ク チ ン produce を raised plus さ せ た. さ ら に, オ ス テ オ ネ ク チ ン の ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト で は, オ ス テ オ ネ ク チ ン は kda pay nearly 38 に 発 し, TGF - beta に よ っ て in し く raised し, ELISA か ら have た rights and consistent に し て い た. (3) ウ シ オ ス テ オ ネ ク チ ン の cDNA を プ ロ ー ブ と し て オ ス テ オ ネ ク チ ン の mRNA を ノ ー ザ ン ブ ロ ッ ト method に よ っ て analysis し た results, TGF - beta に よ っ て mRNA (major band, 2.2 KB; faint band, 3.3kb) <s:1> increase of て て て たけれ たけれ った った, protein レベ で で <s:1> increase of ほ <e:1> more くな った った った. (4) PDGF - AB, bFGF and EGF, IL - 1 beta お よ び TNF alpha は オ ス テ オ ネ ク チ ン の を decrease さ せ た. Above, TGF - beta は 歯 marrow cells の raised colonization を promote し, オ ス テ オ ネ ク チ ン の 発 を now turn 訳 の earlier order お よ び after Duan Jie で adjust し raised plus さ せ る こ と が Ming ら か と な っ た. Youdaoplaceholder0 in vivoに に て て examine するとcondensed dental Mesenchyme の よ う な undifferentiated cells な は raised high yield can が く, one ivory bud cells は rights can yield low が い こ と, さ ら に オ ス テ オ ネ ク チ ン は undifferentiated cells な に は recognize め ら れ な い が, ivory bud cells に は 発 now し て い る こ と か ら, TGF - beta は undifferentiated な 歯 marrow cells に し て raised colonization を high め る の に し polices て, differentiation し た ivory bud cells に し seaborne て は, オ ス テ オ ネ ク チ ン の produce を raised plus さ せ dentin formation に masato and し て い る こ と が exam え ら れ た. こ の よ う に, TGF - beta は 歯 marrow cells か ら の ivory bud cells induced に cut を bear important な service っ て い る factor で あ る こ と が in stopping さ れ た.