高度好塩菌における、代謝などのストレス負荷により誘導される抗癌剤排出蛋白の同定

高嗜盐细菌代谢应激负荷诱导的抗癌药物流出蛋白的鉴定

• 批准号: 07772127
• 负责人: 宮内 正二
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07772127/
• 关键词: matabolic stress; glucose-induced MDR; amino acid-induced MDR; Haloferax volcanii; ATP binding cassette

過剰量の様々な栄養物質により活性化する抗癌剤排出ポンプ:抗癌剤を含む培地で培養しなくても、過剰量のグルコース、アミノ酸、アルコール存在下での培養により抗癌剤排出ポンプが誘導されてくることを明きらかにした。この活性化にはこれらの代謝が必須であることが明らかにした。通常の培地で培養した場合でも、少ないながらも排出活性が観察された。更に、これら誘導されてくる排出ポンプが同一であるか否かについて検討をおこなった。これら誘導されてくるポンプのエネルギー系はATPの加水分解であった。一方、ATP依存性は、抗癌剤により誘導されてくるポンプと過剰量アミノ酸により誘導されてくるものと同じであたったが、糖による誘導は異なっていた。このことにより、過剰量の糖により誘導されてくる排出ポンプは、抗癌剤あるいは過剰量アミノ酸により誘導されてくるものと異なることが示唆された。また、抗癌剤により誘導される排出ポンプ、過剰量グルコースにより誘導されるもの、内在的に存在するものは、基質特異性、阻害剤による阻害曲線が異なるという結果も得られており、いくつもの排出ポンプが存在すると推察された。現在、これら排出ポンプの分子種のシークエンスを行っている。5P-糖蛋白類似排出ポンプの遺伝子クローニング:抗癌剤、アミノ酸、及びグルコースにより誘導されてくる排出輸送担体性質が少しずつことなるが、どの輸送担体もATP依存的であり、ATP binding cassette(ABC)を有していると予想される。ABCの一部であるB-motifの保存配列をprimerとしてPCRをかけ、0.6kbp,1kbp,1.8kbpの産物が得られている。このPCR産物は、排出輸送担体の一部であると考えられる。このシークエンスを行った。現在、このPCR産物のなかに、排出ポンプの候補となるクローンをえており、排出ポンプの全シークエンスを行っている。

Anti-cancer agent excretion in excess of amount of nutrient substance: Anti-cancer agent in culture, in excess of amount of nutrient substance, in culture, in the presence of nutrient substance, in culture, in the presence of This activity is necessary for metabolism. In general, in the case of culture, the activity of the enzyme is detected. This is the first time that I've ever been in a relationship with someone else. This is the first time that the ATP has been hydrolyzed. A party, ATP dependence, induction, etc. The amount of sugar in the mixture is reduced to the amount of sugar in the mixture. In addition, the anti-cancer agent can induce the efflux, induce the efflux. Now, we're going to have to go through this process. 5 P-glycoprotein-like protein excretion pathway: anticancer agent, anti-inflammatory acid, and anti-inflammatory agent; induced excretion of transport vector properties; ATP dependent transport vector; ATP binding cassette(ABC); and so on. A part of ABC was preserved by PCR, and the products of 0.6kbp, 1kbp and 1.8kbp were obtained. The PCR product was removed from a part of the carrier. This is the first time that I've seen you. Now, the PCR product is deleted, the candidate for the deletion is deleted, and the complete deletion is deleted.

项目成果

Koichi Kaidoh: "Rhodamis 123 efflus transporter in Haloferax volcanii is induced when culsured under ‘matabolic stress'by amino acids the efflus system resembles that in Dox-resistant mutant" Biochemical Journal. 314. 355-359 (1996)

Koichi Kaidoh：“Haloferax volcanii 中的 Rhodamis 123 流出转运蛋白在氨基酸‘代谢应激’下被诱导，该流出系统类似于 Dox 抗性突变体”《生化杂志》314. 355-359 (1996)。

Masaki Komatsubara: "Doxorubicin-efflus pump in Haloferax volcanii is energized by ATP" FEMS Microbiology Letters. (in press). (1996)

Masaki Komatsubara：“Haloferax volcanii 中的阿霉素流出泵由 ATP 提供能量”FEMS 微生物学快报。