高度好塩菌における、代謝などのストレス負荷により誘導される抗癌剤排出蛋白の同定

鉴定高嗜盐细菌中代谢应激等应激负荷诱导的抗癌药物流出蛋白

• 批准号: 08772054
• 负责人: 宮内 正二
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08772054/
• 关键词: matabolic stress; glucose-lnduced MDR; amino acid-induced MDR; Haloferax volcanii; ATP binding cassette,

高度好塩菌の一種、Haloferax volcaniiが利用することができる栄養物質はglucoseやfructoseである。大過剰量のこれらの糖添加により、様々な抗癌剤を排出する、抗癌剤排出ポンプが誘導された。一方、この細菌が利用することができない糖、2-deoxy-glucose,3-O-methyl-glucoseなどでは誘導が起こらないことを明らかにした。この誘導には代謝が必須であり、過剰量の糖による代謝負荷が抗癌剤排出ポンプの誘導を引き起こしたと推察された。実際、様々なアミノ酸を過剰量に培地中に添加することにより、同様の抗癌剤排出ポンプが誘導された。この誘導の生理的意義として、過剰量の栄養物の負荷により有害な代謝物が生じ、その除去にこの抗癌剤排出ポンプが働いているのではと考えられた。H.volcaniiの排出ポンプはATPの加水分解エネルギーをエネルギー源として抗癌剤を排出していた。これらの知見より、過剰量の糖負荷などのストレスにより誘導されてくる抗癌剤排出ポンプはATP駆動型であり、ATP binding cassette(ABC)を有していると予想される。そこで、ABCの一部であるB-motifの保存配列のdegenerate primerを作成し、PCRを行ったところ、約0.5kbpの産物が得られた。この0.5kbpのPCR産物の中から、動物細胞において発現しているP-glycoprotein(MDR1,2)に相同性の高いPCR産物をクローン化した。現在、このPCR産物をプローブとして、H.volcaniiのgenomic libraryから排出輸送担体の遺伝子をクローニング中である。

A kind of highly good bacteria, Haloferax volcanii is used to treat glucose and fructose bacteria. A large amount of sugar is added, anti-cancer drugs are excreted, and anti-cancer drugs are excreted. On the one hand, the fungus is used to treat sugar, 2-methoxymethyloxanthine glucose3 and 2-methyloxylated glucose in the guise of methylglucose poisoning. It is necessary to use high levels of glucose in the treatment of cancer, and to induce the elimination of high levels of glucose. In the international market, we need to add anti-cancer drugs in the training ground, and excrete them in the same way as anti-cancer drugs. In order to guide the meaning of physiology, it is necessary to determine the meaning of physiology, to prevent the production of harmful substances, to remove drugs, to fight cancer, and to expel cancer. H.volcanii excretion, ATP, water decomposition, anti-cancer, anti-cancer, water decomposition, anti-cancer, water decomposition, anti-cancer, anti-cancer and anti-cancer. Do not know the amount of sugar, the amount of sugar, the amount For example, you can use the degenerate primer B-motif to make it, and the PCR to make it, and the 0.5kbp to save it. In the 0.5kbp PCR objects, the cells of the animals show that they are the same as the P-glycoprotein (MDR1,2). The high PCR objects are similar to each other. Now, the PCR material is used to remove the burden, and the H.volcanii genomic library to discharge the load.

项目成果

Masaki Komatsubara: "Doxorubicin-efflu pump in Haloferax volcanii is energized by ATP" FEMS Microbiol. Letts.139. 83-88 (1996)

Masaki Komatsubara：“Haloferax volcanii 中的阿霉素流出泵由 ATP 提供能量”FEMS 微生物。

Koichi Kaidoh: "Rhodamine 123 efflu transporter in Haloferax volcanii is induced when cultured under metabolic stress by amino acid" Biochem. J.314. 355-359 (1996)

Koichi Kaidoh：“Haloferax volcanii 中的罗丹明 123 流出转运蛋白在氨基酸代谢应激下培养时被诱导”Biochem。