Ras関連低分子量G蛋白により活性化されるPAKの細胞内情報伝達における役割

Ras相关低分子G蛋白激活PAK在细胞内信号转导中的作用

• 批准号: 07780515
• 负责人: 長田 真一
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780515/
• 关键词: マップキナーゼ; ras; rac; トランスフォーメーション; PAK; 優性抑制型変異体

酵母のMAPKKKに相同なほ乳類のキナーゼを検索する過程で見いだしたキナーゼのなかで、我々がMRK2と名付けたものは低分子量Gタンパク質であるracに結合するキナーゼとして見いだされたPAKと同一であった。活性型racが細胞のトランスフォーメーションを引き起こすことや、SAPK/JNKのマップキナーゼ経路を活性化することが報告され、PAK/MRK2がその媒介因子であると想定されるに至ったが、その真偽は未だに不明である。そこで、PAK/MRK2の変異体を作成し、NIH3T3細胞のトランスフォーメーションに対する効果と、TRE(TPA-response element)エンハンサー活性化に及ぼす効果を検討した。活性型rasや活性型racは上述の両方の活性を示した。優性抑制型のrasは活性型rasの効果のみを抑制した。一方、優性抑制型racは活性型rasや活性型racの上述の二つの活性を共に抑制した。興味深いことに、PAK/MRK2の制御ドメインのみを持つ変異体は優性抑制型racと同様の作用を示した。このことはPAK/MRK2或いはその相同タンパク質がracの下流で機能していることを示唆している。一方、同様の過程で見いだしたMRK1もPAK/MRK2と同様のMAPKKKKとしての構造を示す。PAK/MRK2は酵母のMAPKKKKであるSTE20と50%以上の、MRK1は酵母のMAPKKKKであるSPS1と50%以上の相同性を示す。そこで、既知のマップキナーゼ経路、ERKとSAPK/JNK経路を活性化する能力を試験したがこれらに対する効果を確認することはできなかった。一方、同様の過程で見いだされたMUKがSAPK/JNK経路を特異的に活性化することを見いだした。MUKはSAPK/JNK経路の活性化キナーゼであるSEKをリン酸化、活性化することも確認した。すなわちMUKはSAPK/JNK経路のMAPKKKであることが明らかとなった。

The yeast MAPKK is the same as the milk. Active rac cells are activated in the SAPK/JNK pathway, PAK/MRK2 is a mediator, and its authenticity is unknown. The PAK/MRK2 variant was produced and the NIH3T3 cell line was activated. The TRE(TPA-response element) was activated. Active ras, active rac, and the activity of the above formulas are shown. Suppressed ras are active ras. One side, superior inhibition type rac activity type ras activity type rac and above two kinds of activities are jointly inhibited. PAK/MRK2 control system is characterized by its ability to control the interaction of different types of RACs. PAK/MRK2 or MRK 2 The structure of MRK1, PAK 2 and MAPKKK 2 is shown. PAK/MRK2 has more than 50% identity with yeast MAPKKK and MRK1 has more than 50% identity with yeast MAPKKK. The ability to activate the ERK/SAPK/JNK circuit is tested and the results are confirmed. A party, the same process is seen in the middle of the MUK, SAPK/JNK pathway is seen in the middle of the activation. The activation of the SAPK/JNK pathway is confirmed by the activation of SEK. MAPKKK is the SAPK/JNK circuit.

项目成果

Wang,F.,Naik,U.P.,Ehrlich,Y.H.,Osada,S.,Ohno,S.and Komecki,E.: "Stimulatory antibody-induced activation and selective translocation of protein kinase C isoenzymes in human platelets." Biochem.J.311. 401-406 (1995)

Wang,F.、Naik,U.P.、Ehrlich,Y.H.、Osada,S.、Ohno,S. 和 Komecki,E.：“刺激性抗体诱导的人血小板中蛋白激酶 C 同工酶的激活和选择性易位。”

Nishioka,N.,Hirai,S.,Mizuno,K.,Osada,S.,Suzuki,A.,Kosaka,K.,and Ohno,S.: "Wortmannin inhibits the activation of MAP kinase following Vasopressin V1 receptor stimulation." FEBS Lett.377. 393-398 (1995)

Nishioka,N.、Hirai,S.、Mizuno,K.、Osada,S.、Suzuki,A.、Kosaka,K. 和 Ohno,S.：“渥曼青霉素在加压素 V1 受体刺激后抑制 MAP 激酶的激活。

Akimoto,K.,Takahashi,R.,Moriya,S.,Nishioka,N.,Takayanagi,J.,Kimura,K.,Fukui,Y.,Osada,S.,Mizuno,K.,Hirai,S.,Kazlauskas,A.,and Ohno,S.: "EGF and PDGF receptors activate atypical PKC λ through phosphatidylinositol 3-kinase." EMBO J.(in press).

秋本 K.、高桥 R.、守谷 S.、西冈 N.、高柳 J.、木村 K.、福井 Y.、大田 S.、水野 K.、平井 S.、 Kazlauskas, A. 和 Ohno, S.：“EGF 和 PDGF 受体通过磷脂酰肌醇 3-激酶激活非典型 PKC λ。”EMBO J.（正在出版）。

Mizuno,K.Noda,K.,Ueda,Y.,Hanaki,H.,Saido,T-C.,Suzuki,K.,Ikuta,T.,Kuroki,T.,Tamaoki,T.,Hirai,S-I.,Osada,S.and Ohno,S.: "UCN-01,an anti-tumor drug,is a selective inhibitor of the conventional PKC subfamily." FEBS Lett.359. 259-261 (1995)

水野K.野田K.、上田Y.、花木H.、斋藤T-C.、铃木K.、生田T.、黑木T.、玉置T.、平井S-I.、大田

Hirano,M.,Osada,S.,Aoki,T.,Hirai,S.,Hosaka,M.,Inoue,J.,and Ohno,S.: "MEK kinase is involved in TNF α-mediated activation of NFkB and degradation of IkB α。" J.Biol.Chem.(in press).

Hirano, M.、Osada, S.、Aoki, T.、Hirai, S.、Hosaka, M.、Inoue, J. 和 Ohno, S.：“MEK 激酶参与 TNF α 介导的 NFkB 激活和“IkB α 的降解。”J.Biol.Chem.（正在出版）。