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ジーンターゲッティング法を用いたニワトリH1ヒストン遺伝子群の機能解析

基因打靶法对鸡H1组蛋白基因组的功能分析

基本信息

批准号：
07780605
负责人：
高見恭成
金额：
$ 0.58万
依托单位：
宮崎医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780605/
关键词：
ヒストン遺伝子発現

项目摘要

H1ヒストンは約200個のアミノ酸よりなるリジンに富んだクロモソーマルタンパク質のグループである。これらのタンパク質はヌクレオソーム鎖の凝縮による高次構造形成に重要であると考えられている。H1ヒストンは5種のヒストンのなかでも最もheterogenousであり、ニワトリでは6遺伝子存在し、それぞれが異なるアミノ酸配列を有する6種のバリアントをコードする。この多様性の意義については明らかでないが、これらバリアントの発現は発生や分化、を通じて異なる制御を受けているため、機能的に異なっている可能性が考えられる。H1ヒストンの役割に関する推察のほとんどがin vitroでの再構成系での研究に基づいており、実際にin vivoでのH1の機能を調べた研究は皆無に等しい。今回、H1バリアント間での機能的相違の有無をin vivoで明らかにする目的で、ターゲットインテグレーションを高頻度で起こすことが知られるDT40細胞を用いたジーンノックアウト法で個々のH1ヒストンバリアント遺伝子欠損変異株を作製し、種々の諸性質を比較検討した。現在までに、6種のH1バリアントの中、5種をそれぞれ1つ欠失した変異株を作製に成功している。これら変異株の解析を行なったところ、形態およびgrowth速度に変化は認められなかった。変異株間での遺伝子発現の変動を、総タンパク質の2次元電気泳動パターンを比較することにより検討したところ、明らかにいくつかのスポットに特異的な変化があり、特定のH1バリアントの欠損に伴って、いくつかの蛋白質の発現に変化が認められた。すなわち、各H1ヒストンバリアントは特定の遺伝子発現に寄与していると考えられる。現在、これらの蛋白質の同定を試みている。これらの結果は、H1ヒストンはクロマチンの構造維持等の他に、クロマチンの構造変化による特定の遺伝子発現制御を含めた固有の生理機能を担っている可能性を示している。

The H1 test site contains approximately 200 samples of the H1 test site. The formation of higher-order structures is important for the quality of materials. The H1 gene has 5 different genes, 6 different genes, and 6 different genes. The meaning of diversity is different from that of light, and the possibility of development is different from that of light, and the possibility of function is different from that of light. The research on the reconstruction system of H1 in vitro and the adjustment of H1 function in vivo are all insignificant. This paper compares the properties of DT40 cells, which are known to be used in vivo, with those of H1 cells, which are deficient in gene expression, and with those of H1 cells, which are deficient in gene expression. Now, 5 of the 6 H1 varieties are ready for production. The analysis of different plants is very important. The morphology and growth speed are very important. A comparison of the variation of protein development between different plants, and the variation of protein development between different plants. All H1-related information is transmitted to the user in response to a specific event. Now, the protein identity of the protein is determined by the test. As a result, the possibility of the development of specific genes, including inherent physiological functions, is shown in other aspects such as structural maintenance and structural transformation.