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アンモニア酸化反応に関与する新規な金属酵素中の活性点構造とその性質に関する研究

アンモニア酸化反応に関与する新規な金属酵素中の活性点構造とその性質に関する研究
新型氨氧化金属酶活性位点结构及其性质研究
批准号：
07750862
负责人：
青野 重利
金额：
$0.7万
依托单位：
Japan Advanced Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1995 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07750862/
关键词：
酸化還元酵素ヒドロキシアミン硝化反応

项目摘要

项目成果

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本研究では、硝化細菌Arthrobacter globiformisからのアンモニアモノオキシゲナーゼ、ヒドロキシアミン酸化酵素、亜硝酸酸化酵素の単離精製を試みた。培養に用いたArthrobacter globiformisは、発酵研究所(IFO)より購入した。本菌は、コハク酸ナトリウム、酢酸ナトリウムを炭素源、硫酸アンモニウムを窒素源とし、その他に硫酸マグネシウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化銅、塩化鉄、塩化亜鉛を含む倍地において良好な生育を示した。培養は、バッフル付き三角フラスコに上記の培地を仕込み、好気的条件下、30度で行った。培養終了後、遠心分離により菌体を集め、50mM Tris-HCl緩衝溶液(pH8.0)に懸濁する。超音波処理により菌体を破壊した後、遠心分離、超遠心分離を行い可溶性画分を得た。このようにして調製した可溶性画分のアンモニアモノオキシオナーゼ、ヒロドキシアミン酸化、および亜硝酸酸化活性を測定したところ、比較的強い亜硝酸酸化活性が観測された。亜硝酸酸化活性の測定は、電子受容体としてフェリシアン化カリウムあるいは酸化型チトクロームcを用いて行った。アンモニアモノオキシゲナーゼ、ヒドロキシアミン酸化活性は、ほとんど検出されなかった。これは、これらの酸素が酸素に対して不安定であるため、可溶性画分調製段階において失活してしまったのではないかと考えられる。次に、可溶性画分をイオン交換カラムに添加し、亜硝酸酸化酵素の精製を試みたが、現在のところ、精製には成功していない。
期刊论文(4)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
S.Aono: "Thermostability and electron transfer activity of the ferredoxin from a thermophilic hydrogen oxidizing bacterium,Bacillus schlegelii" J.Mol.Catal.95. 173-178 (1995)
S.Aono：“来自嗜热氢氧化细菌 Bacillus schlegelii 的铁氧还蛋白的热稳定性和电子转移活性”J.Mol.Catal.95。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.Aono: "The effect of negative chatge of heme propionate on photoinduced electron transfer between zinc myoglobin and methylviologen" Inorg.Chim.Acta. 233. 127-129 (1995)
S.Aono：“丙酸血红素对锌肌红蛋白和甲基紫精之间光诱导电子转移的影响”Inorg.Chim.Acta。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.Aono: "Photoreduction of cytochrome c with zinc protoporphyrin reconstituted myoglobin(ZnPP-Mb)" J.Mol.Catal.95. 193-196 (1995)
S.Aono：“用锌原卟啉重构肌红蛋白（ZnPP-Mb）对细胞色素 c 进行光还原”J.Mol.Catal.95。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.Aono: "The effect of chemical modification of zinc myoglobin on the photoinduced electron transfer with methylviologen" J.Mol.Catal.96. 87-92 (1995)
S.Aono：“锌肌红蛋白的化学修饰对甲基紫精光诱导电子转移的影响”J.Mol.Catal.96。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
ガス分子により駆動される新規なセンサータンパク質の機能発現機構
ガスセンサー蛋白質の時間分解紫外共鳴ラマン分光
タンパク質配位空間を利用した気体分子センシングとシグナル伝達
タンパク質配位空間を利用した気体分子センシングとシグナル伝達
海外基金