P型ATPaseの構造と機能

P型ATP酶的结构和功能

• 批准号: 07760283
• 负责人: 石井 利明
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka Prefecture University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07760283/
• 关键词: Na^+; K^+-ATPase; SR Ca^<2+>-ATPase; イオンセンサー

Na^+,K^+-ATPaseとSRCa^<2+>-ATPaseの両ATPaseに存在するK^+イオン感受性領域(K^+イオンセンサー)を決定するため、ニワトリNa^+,K^+-ATPaseα1サブユニットとSRCa^<2+>-ATPase間のキメラATPaseを作製した。Ca^<2+>依存性,タプシガルジン感受性のSRCa^<2+>-ATPASE活性は,K^+イオンの非存在下においても活性を有するが,その活性は,K^+イオンの添加によりさらに爆発的に活性化される。K^+イオンによる活性化様式は,高感受性(ED50,^-20mM)と低感受性(ED50,^-70mM)の二相性であった。[n/c]CCおよびCNCキメラATPaseのタプシガルジン感受性SRCa^<2+>-ATPase活性もまた,野性型CCCと同様,二相性のK^+イオンによる活性化様式を示した。それに対して,CC[c/n/n]キメラATPaseのタプシガルジン感受性SRCa^<2+>-ATPase活性は,野性型Na^+,K^+-ATPase(NNN)のK^+イオン感受性と同等の高感受性一相性(ED50,<10mM>の活性化様式を示した。これらの結果は,Na^+,K^+-ATPaseのK^+イオン感受性領域(K^+イオンセンサー)がNa^+,K^+-ATPaseα1サブユニットC末端領域(Leu861-C末端領域)に存在することを示唆するものである。また,SRCa^<2+>-ATPaseのK^+イオン低感受性のK^+イオンセンサーも同様に,SRCa^<2+>-ATPaseのC末端領域(Ser830-C末端領域)に存在することを証明するものである。そこで,Na^+,K^+-ATPaseα1サブユニットC末端領域をさらに限局させた2つのキメラATPase,CC[c/n/c]およびCC[c/c/n]を作製した。CC[c/c/n]キメラATPaseのタプシガルジン感受性SRCa^<2+>-ATPase活性に対するK^+イオンの感受性は,CC[c/n/n]キメラATPaseのそれと同様,野性型NNNのK^+イオン感受性と同等の高感受性一相性(ED50,<10mM>の活性化様式を示した。それに対して,CC[C/N/C]キメラATPaseのタプシガルジン感受性SRCa^<2+>-ATPase活性に対するK^+イオンの感受性は,野性型CCCと同様,二相性のK^+イオンによる活性化様式を示した。Na^+,K^+-ATPaseα1サブユニットC末端領域(Met889-C末端領域)には,Na^+,K^+-ATPaseのK^+イオンセンサーが存在することを証明した。

Na^+,K^+-ATPase and SRCa^<2+>-ATPase are present in the K^+-sensitive domain (K^+-sensitive domain), and Na^+,K^+-ATPaseα1 is present in the SRCa^<2+>-ATPase domain. Ca^<2+> dependence, Ca ^<2+>-ATPASE activity,K^+-free activity, reverse activity,K^+-free activity. K^+ is active in a variety of ways, with high susceptibility (ED50,^-20mM) and low susceptibility (ED50,^-70mM) and biphasic. [n/c]CC, CNC, CCCC, CC CC[c/n/n]-ATPase activity is similar to that of wild Na ^+, K ^+-ATPase(NNN), and K ^+-ATPase activity is similar to that of wild Na^+,K^+-ATPase<10mM>. As a result,Na^+,K^+-ATPase K^+-terminal domain (K^+ terminal domain) and Na^+,K^+-ATPaseα1 terminal domain (Leu861-C terminal domain) exist. In addition, the existence of the C-terminal domain (Ser830-C-terminal domain) of SRCa ^&lt;2 +&gt;-ATPase was demonstrated in the same way as K^+-domain of SRCa^&lt;2+&gt;-ATPase with low sensitivity. Na^+,K^+-ATPaseα1 C ATPase CC [c/n] CC [c/n] CC[c/n]-ATPase sensitivity SRCa^&lt;2+&gt;-ATPase activity response K^+-ATPase sensitivity,CC[c/n]-ATPase sensitivity response, wild NNN K^+-ATPase sensitivity response high sensitivity response (ED50, <10mM>activation response). CC[C/N/C]-ATPase activity is sensitive to K^+, whereas CC[C/N/C]-ATPase activity is sensitive to K^+. Na^+,K^+-ATPaseα1-terminal domain (Met889-C-terminal domain),Na^+,K^+-ATPase K^+-terminal domain,Na^+, K ^+-ATPase α 1-terminal domain.