チフス菌Vi抗原の病原因子としての役割に関する研究

伤寒沙门氏菌Vi抗原作为致病因子的作用研究

• 批准号: 07770191
• 负责人: 橋本 安弘
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770191/
• 关键词: Salmonella typhi; Vi抗原

チフス菌のVi抗原はこの菌の重要な病原因子として考えられてきたがVi陽性と陰性のisogenic strainsを用いた研究報告はなく今迄の結果が別の遺伝子変異によるものである可能性を否定できなかった。我々は染色体上の遺伝子に薬剤耐性遺伝子(cat)を挿入することにより、Vi抗原の生合成に必要な遺伝子(vipA)と調節遺伝子(vipR)をそれぞれ破壊した二つの変異株を作製した。これらの変異株および親株を用いチフス菌の感染成立に不可欠な血清抵抗性、上皮細胞への侵入性および食細胞内での増殖性にVi抗原が貢献しているかをin vitro実験系で調べた。1.血清抵抗性:健常人から得た血清に1/10量の菌液(10^6CFU/ml)を加え一定時間37Cで保温し生残菌数を調べた。vipAとvipRの変異株では30min以内に菌は検出されなくなったが、親株では1時間後にも約半数の菌が生存していた。Vi抗原は血清抵抗性に必要であることを確認した。上皮細胞への侵入性:Hela細胞への侵入性をしらべたが、変異株と親株のあいだに有意な違いは認められなかった。食細胞内増殖性:チフス菌をヒト由来マクロファージ様細胞株THP-1に100:1の割合で感染させ1時間培養後、ゲンタマイシン処理し一晩培養を続け菌数を測定した。感染1時間後の顕微鏡下での観察では菌株間による食細胞内への取り込みの差は認められなかったが、一晩培養後には顕著な差が観察された。親株、vipR変異株、vipA変異株の順で増殖性が顕著に低下していた。Vi抗原の変異株間(vipAとvipR)で見いだされた増殖性の違いについて現在解析中であるが、これらの結果からVi抗原は食細胞内での増殖におても必要であると考えられた。

A study on the use of Vi positive and negative isogenic strains in pathogenic bacteria has been carried out. We have the ability to control two different strains of Vi antigen, vipA and vipR, which are essential for the production of Vi antigen. The establishment of infection by these strains and their parent strains is not mediated by serological resistance, epithelial cell invasiveness, and intracellular reproduction. Vi antigens contribute to this process. 1. Serum resistance: healthy people get serum 1/10 of the amount of bacteria solution (10^6 CFU/ml), add a certain time 37C, and adjust the number of viable residual bacteria. Vip A and vip R are the most common strains in the world. Vi antigen resistance is necessary Invasiveness of epithelial cells: Invasiveness of Hela cells Cell line THP-1:100:1 1 hour after infection, the microscopical examination showed that there was no difference between the strains and the cells. The parent plant, vipR mutant plant, vipA mutant plant, and their reproductive characteristics are lower than those of the parent plant. Vi antigen and vip (vip A and vip R) are found in the present analysis, and the results are found in the analysis of vip A and vip R.

项目成果

Yasuhiro Hashimoto: "Development of nested PCR based on the ViaB sequence to detect Salmonella typhi" J. Clin. Microbiol.33(3). 775-777 (1995)

Yasuhiro Hashimoto：“开发基于 ViaB 序列的巢式 PCR 来检测伤寒沙门氏菌”J. Clin。