チフス菌Vi抗原のVW変異の遺伝子解析
伤寒沙门氏菌 Vi 抗原 VW 突变的遗传分析
基本信息
- 批准号:05770185
- 负责人:
- 金额:$ 0.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1993
- 资助国家:日本
- 起止时间:1993 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
チフス菌のVi抗原の発現に必要な環境因子を調べるため種々の条件下で培養しVi抗原の産生量について検討した。Vi抗原の生産量は抗Vi抗体を用いた凝集反応で判定量的に調べた。培地成分、温度ならびに培養方法を検討した結果、Vi抗原の発現は温度に依存し、37Cで最も強く発現されたが、20Cでは発現されなっかた。好気培養より嫌気培養または5%の炭酸ガス培養のほうが産生量が増加した。Vi抗原の産生量とVi多糖の生合成酵素量とが相関するかどうかを調べるためVi多糖のkeyenzymeをコードしているvipA遺伝子にプロモタ-の欠失したcat遺伝子を挿入しvipA産物の発現量をCAT活性を指標にして調べた。20Cに比べ37CではCAT活性は20倍以増加し、また好気培養より嫌気培養または炭酸ガス培養のほうが2倍以上CAT活性が増加した。このことからVi抗原の発現はvipAの転写レベルで調節されていることが明らかになった。Vi抗原の制御因子を同定するためvipA:cat fusion株を用いCAT活性の低下した変異株を分離した。変異株は少なくとも2つ以上のグループに分けられた。一つはvipA遺伝子の上流に見いだされたorf(vipRと命名)に変異をもつグループであった。vipRの変異株は親株に比べ100以上CAT活性が減少していた。VipRの推定アミノ酸配列からvipR産物は分子量21000で塩基性タンパクでありC末端にヘリックス-ターン-ヘリックスの構造を有しDNA結合性の制御因子であると考えられた。vipRの発現量は上記培養条件下でのVi抗原の発現量と相関することからvipRが環境因子により発現調節をうけ、発現されたvipR産物がvipAの発現を調節していると考えられた。他の一つののグループは大腸菌のrcsbに対応する遺伝子に変異を持つものであった。親株からこの遺伝子をクローニングした結果、大腸菌のRCSBと98%以上の相同性が認められた。
The amount of Vi antigen produced in culture under the condition that environmental factors are necessary for the production of Vi antigen Vi antigen production and anti-Vi antibody determination Culture composition, temperature and culture method were discussed. The development of Vi antigen was temperature dependent. The strongest development was at 37C. The strongest development was at 20C. The production of 5% carbon dioxide in the culture medium was increased. Vi antigen production and Vi polysaccharide production enzymes are correlated. Vi polysaccharide keyenzyme production is correlated with vipA protein production. Vi polysaccharide keyenzyme production is correlated with CAT activity. CAT activity increased by 20 times at 20C compared with 37C, and CAT activity increased by more than 2 times at 20 C compared with 37 C. The expression of Vi antigen is regulated by vipA. Vi antigen control factor is determined by vipA:cat fusion, but CAT activity is low. The difference between the number of trees and the number of trees is more than 2. A vip A heritage of the upper stream see in the middle of the orf(vip R name) CAT activity of vipR was decreased when compared with that of its parent plants above 100 The putative acid sequence of vipr has a molecular weight of 21000 and a structure of 21000. The production of vipR is regulated by environmental factors, and the production of vipR products is regulated by environmental factors. He is a member of the RCSB. More than 98% identity of RCSB of E. coli was identified.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Yasuhiro Hashimoto: "Molecular cloning of the ViaB region ofSalmonella typhi" FEMS Microbiol.Lettes.90. 53-56 (1991)
Yasuhiro Hashimoto:“伤寒沙门氏菌 ViaB 区域的分子克隆”FEMS Microbiol.Lettes.90。
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