表皮細胞のサイトカイン分泌と接着分子発現へのスフィンゴシンおよびセラミドの影響

鞘氨醇和神经酰胺对表皮细胞细胞因子分泌和粘附分子表达的影响

• 批准号: 07770660
• 负责人: 脇田 久史
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770660/
• 关键词: セラミド; スフィンゴシン; 表皮細胞

IFN-γによる皮膚表皮細胞ICAM-1,HLA-DRの発現誘導時にsphingolipidが何らかの修飾因子となっているかを検討した。培養細胞は正常表皮培養細胞を用いた。IFN-γによる皮膚表皮細胞ICAM-1,HLA-DRの発現の検索は,flow cytometryによった。細胞浮遊液をFITC-抗ICAM-1mAbとPE-抗HLA-DRmAbで反応させた。解析はConsort30で行い,logで示した蛍光強度の平均値を比較検討した。RT-PCRはGene Amp RNA PCR kitを用いた。sphingosine,ceramide単独では表皮細胞にICAM-1,HLA-DRを発現させなかった。また,IFN-γとの併用によって,IFN-γの効果を促進させなかった。次に,sphingolipidの合成阻害剤であるL-cycloserine,fumonisinB1の存在下で96時間培養して後,IFN-γで刺激したところ,IFN-γの効果を抑制した。この抑制効果はglycosphingolipidの合成阻害剤であるPDMPでは認められなかった。さらに,L-cycloserine,fumonisin B1で前処置した後,IFN-γとともに,ceramideとsphingosineを加えたところ,L-cycloserineによる抑制効果をceramide,sphingosineともに軽減したが,fumonisin B1によるそれはceramideによってのみ軽減された。RT-PCRを用いた検索でもL-cycloserineはIFN-γにより誘導されたICAM-1,HLA-DRのmRNAレベルを減少させ,さらにその効果はceramideとsphingosineにより抑制された。これらの結果から,IFN-γによる培養表皮細胞ICAM-1,HLA-DR発現へのceramideの関与が示唆された。

The expression of ICAM-1 and HLA-DR in human epidermal cells induced by IFN-γ was investigated. Cultured cells are used in normal epidermal cultures. IFN-γ regulates ICAM-1 and HLA-DR expression in epidermal cells and flow cytometry. Cell suspension: FITC-anti-ICAM-1mAb PE-anti-HLA-DR mAb Analyze the average value of the light intensity in Consort30. RT-PCR Gene Amp RNA PCR kit Sphingosine and ceramide are unique to epidermal cells that express ICAM-1 and HLA-DR. IFN-γ and IFN-γ are used together to promote the production of IFN-γ. In addition,IFN-γ was stimulated and inhibited by L-cycloserine and fumonisin B1 in the presence of 96-hour culture. The inhibition effect of glycophosphorid synthesis inhibitor is not recognized. In addition,L-cycloserine,fumonisin B1 was used to inhibit the growth of IFN-γ, ceramide and sphingosine. RT-PCR was used to detect the expression of ICAM-1 and HLA-DR mRNA in IFN-γ and to inhibit the expression of ceramide sphingosine in IFN-γ. The results showed that IFN-γ was associated with ICAM-1,HLA-DR expression and ceramide expression in cultured epidermal cells.