白血病細胞における造血因子の細胞内情報伝達系の解明

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1.白血病細胞株における造血因子の情報伝達系の多様性と共通性種々の、造血因子反応性ヒト白血病細胞株に対して、種々の造血因子(G-CSF,CM-CSF,IL-3,SCF)で刺激したときに生じる、細胞内蛋白のチロシンリン酸化のパターンを解析した。方法は、造血因子で刺激した細胞を可溶化し、SDS-PAGEで分離、転写後、抗リン酸化チロシン抗体でイムノブロットを行った。その結果、同一造血因子でも、細胞株により、チロシンリン酸化のパターンは、一部異なっていた。特に、リンパ球系細胞株と、骨髄球系細胞株では、IL-3によるチロシンリン酸化のパターンは、明かな違いがみられた。また、複数種類の造血因子に反応して増殖する細胞株では、それらの因子により生じるチロシンリン酸化のパターンは、かなりの共通性が認められた。2.白血病細胞株における造血因子の情報伝達系とプロテインキナーゼA、プロテインキナーゼCとの関連種々の、造血因子反応性ヒト白血病細胞株に対して、dbcAMP(PKAの活性化剤)やTPA(PKCの活性化剤)で刺激したときに生じる細胞内蛋白のリン酸化を検討した。TPAによって、一部の細胞では、細胞内蛋白のチロシンリン酸化が生じたが、そのパターンは細胞により異なっていた。増殖刺激に重要な蛋白であるJAK2は、造血因子によりチロシンリン酸化されるが、TPAではリン酸化されなかった。TPAで前処理された細胞では、造血因子刺激によるチロシンリン酸化が見られなくなった。