Funktion und molekulare Struktur der nicht-phosphorylierenden Glycerinaldehyd-3-Phosphat Dehydrogenase von Thermoproteus tenax

来自 Thermoproteus tenax 的非磷酸化甘油醛-3-磷酸脱氢酶的功能和分子结构

基本信息

项目摘要

In vitro-Untersuchungen charakterisieren die NAD+-abhängige, nicht-phosphorylierende Glycerinaldehyd-3-Phosphat Dehydrogenase (GAPN) von Thermoproteus tenax als allosterisch hoch reguliertes Enzym und weisen darauf hin, dass dieses Enzym eine zentrale Kontroll-Funktion im katabolen Embden-Meyerhof-Parnas (EMP)-Weg des Organismus ausübt. Die geplanten Arbeiten zielen darauf ab, die Aktivitäts-Modulation der GAPN unter physiologischen Bedingungen zu bestimmen, um damit die Bedeutung der GAPN für die Kontrolle des Kohlenhydrat-Metabolismus in T. tenax zu belegen und die strukturellen Grundlagen für die katalytischen und regulatorischen Eigenschaften des Enzyms zu analysieren. Zur Bestimmung der GAPN-Aktivität unter physiologischen Bedingungen sollen Enzym-Assays angewandt werden, die bezüglich der Konzentration von Substrat, Kosubstrat und der als Effektoren des Enzyms wirkenden Stoffwechsel-, Energie-Metabolite und Redoxäqivalente sowie bezüglich des pH-Wertes, der dominanten Kationen und Trehalose die intrazelluläre Situation von T. tenax unter verschiedenen trophischen Wachstumsbedingungen simulieren. Röntgen-kristallographische Analysen, die in enger Zusammenarbeit mit der EMBL-Außenstation, Hamburg, durchgeführt werden, sollen Einblick in die molekularen Grundlagen der Katalyse, der allosterischen Regulation und der außerordentlich hohen thermalen Stabilität des Enzyms geben.
体外研究了热变形菌NAD+-结合酶、非磷酸甘油-3-磷酸脱氢酶(GAPN)的变构特性,发现该酶在生物体代谢途径中具有重要的控制功能。通过对GAPN活性的生理调节作用的研究,探讨了GAPN对T. tenax zu belegen und die strukturellen Grundlagen für die katalytischen und regulatorischen Eigenschaften des Enzyms zu analysieren.本文通过韦尔登酶活性测定的生理学方法,对T. tenax unter vertebraedenen troubischen Wachstumsbedingungen simulieren. Röntgen-kristallographische Analysen,die in恩格尔Zusammenarbeit mit der EMBL-Außenstation,Hamburg,durchgeführt韦尔登,sollen Einblick in die molekularen Grundlagen der Katalyse,der allosterischen Regulation und der außerordentlich hohen thermalen Stabilität des enzymes geben.

项目成果

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