Toxicoproteomics: Veränderungen im Proteinmuster von Colonozyten nach Intoxikation mit clostridialen Zytotoxinen

大梭菌Zytotoxine mono-glucosylieren Rho-Proteine，并被证明是一种重要的Zytotoxine调节剂，并具有Genregulation，Zell-Zyklus-Controlle和Zelltod等功能。Die im Berichtszeitraum durchgeführten Arbeiten über die Wirkungen dieser Toxine auf das Proteom von Zielzellen zeigten，dass ca. 40 weitere Proteine Toxin-abhängig in ihrer zellulären Konzentration verändert韦尔登.在拉格中也存在一种催化剂，可使Zielzellen的蛋白质谱发生变化。因此，在Antragszeitraum geplanten Arbeiten soll ne besseres Verständnis der Toxinabhängigen Veränderungen im Proteom der Zielzellen erarbeitet韦尔登，um ein Gesamtbild der zellulären Veränderungen zu erhalten.大足是一个实验基地。A）通过LC-MS-Systems验证新的Hochauflösenden LC-MS-Systems进行蛋白质分析韦尔登，B）蛋白质，通过毒素检测，韦尔登在LC-MS蛋白质定量分析中;动力学和对照-Wirkungsbeziehungen solestimt韦尔登，C）Signalwege，毒素处理后的Rho（野生型毒素）bzw。Rho-unabhängig（katalytisch inaktive Toxinmutante）zu Änderungen im Proteom führen，sollen aufgeklärt韦尔登; hierfür wird das Kinom der Toxin-behandelten Zellen charakterisiert.这些细菌在发酵过程中产生大量的梭状芽孢杆菌，并在发酵过程中产生大量的细菌。本文对大足韦尔登菌进行了艰难梭菌培养或细菌感染的研究，并对该菌的蛋白质组学进行了分析。在使用产生的毒素进行治疗的过程中，我们发现，在没有任何细菌的情况下，Hinweise可能会导致A型和B型毒素的产生。

Die großen clostridialen Zytotoxine mono-glucosylieren Rho-Proteine und bewirken so eine Inaktivierung dieser essentiellen Regulatoren des Zytoskeletts und anderer zellulärer Funktionen wie Genregulation, Zell-Zyklus-Kontrolle und Zelltod. Die im Berichtszeitraum durchgeführten Arbeiten über die Wirkungen dieser Toxine auf das Proteom von Zielzellen zeigten, dass ca. 40 weitere Proteine Toxin-abhängig in ihrer zellulären Konzentration verändert werden. Auch eine katalytisch inaktive Toxinmutante ist in der Lage, das Proteinprofil der Zielzellen zu verändern. Durch die im Antragszeitraum geplanten Arbeiten soll ein noch besseres Verständnis der Toxinabhängigen Veränderungen im Proteom der Zielzellen erarbeitet werden, um ein Gesamtbild der zellulären Veränderungen zu erhalten. Dazu sind folgende Experimente geplant. A) die Proteomanalysen werden durch den Einsatz eines neuen hochauflösenden LC-MS-Systems verifiziert, B) die Proteine, deren Konzentrationen sich Toxin-abhängig verändern, werden in einen gerichteten LC-MS Proteomansatz quantifiziert; Kinetik und Konzentrations-Wirkungsbeziehungen sollen bestimmt werden, C) Signalwege, die nach Toxin-Behandlung über Rho (Wildtyp-Toxin) bzw. Rho-unabhängig (katalytisch inaktive Toxinmutante) zu Änderungen im Proteom führen, sollen aufgeklärt werden; hierfür wird das Kinom der Toxin-behandelten Zellen charakterisiert. Die Suche nach weiteren bakteriellen Faktoren, die neben den großen clostridialen Zytotoxinen an den zellulären Veränderungen beteiligt sind, schließt sich an. Dazu werden Colonzellen mit Kulturüberstand von Clostridium difficile oder mit intakten Bakterien (zelluläre Infektion) behandelt und die Auswirkungen auf das Proteom wird analysiert. Unterschiede im Vergleich zur Behandlung mit gereinigten Toxinen sollen herausgearbeitet werden und könnten Hinweise auf weitere unbekannte bakterielle Faktoren sein, die zusätzlich zu den bekannten Hauptpathogenitätsfaktoren ToxinA und B wirken.