Toxicoproteomics: Veränderungen im Proteinmuster von Colonozyten nach Intoxikation mit clostridialen Zytotoxinen

毒理学蛋白质组学：梭菌细胞毒素中毒后结肠细胞蛋白质模式的变化

• 批准号: 52813917
• 负责人: Professor Dr. Andreas Pich
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Toxikologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2006-12-31 至 2010-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/52813917?language=en
• 关键词: Toxicoproteomics; Ver; nderungen; im; Proteinmuster

Die großen clostridialen Zytotoxine mono-glucosylieren Rho-Proteine und bewirken so eine Inaktivierung dieser essentiellen Regulatoren des Zytoskeletts und anderer zellulärer Funktionen wie Genregulation, Zell-Zyklus-Kontrolle und Zelltod. Die im Berichtszeitraum durchgeführten Arbeiten über die Wirkungen dieser Toxine auf das Proteom von Zielzellen zeigten, dass ca. 40 weitere Proteine Toxin-abhängig in ihrer zellulären Konzentration verändert werden. Auch eine katalytisch inaktive Toxinmutante ist in der Lage, das Proteinprofil der Zielzellen zu verändern. Durch die im Antragszeitraum geplanten Arbeiten soll ein noch besseres Verständnis der Toxinabhängigen Veränderungen im Proteom der Zielzellen erarbeitet werden, um ein Gesamtbild der zellulären Veränderungen zu erhalten. Dazu sind folgende Experimente geplant. A) die Proteomanalysen werden durch den Einsatz eines neuen hochauflösenden LC-MS-Systems verifiziert, B) die Proteine, deren Konzentrationen sich Toxin-abhängig verändern, werden in einen gerichteten LC-MS Proteomansatz quantifiziert; Kinetik und Konzentrations-Wirkungsbeziehungen sollen bestimmt werden, C) Signalwege, die nach Toxin-Behandlung über Rho (Wildtyp-Toxin) bzw. Rho-unabhängig (katalytisch inaktive Toxinmutante) zu Änderungen im Proteom führen, sollen aufgeklärt werden; hierfür wird das Kinom der Toxin-behandelten Zellen charakterisiert. Die Suche nach weiteren bakteriellen Faktoren, die neben den großen clostridialen Zytotoxinen an den zellulären Veränderungen beteiligt sind, schließt sich an. Dazu werden Colonzellen mit Kulturüberstand von Clostridium difficile oder mit intakten Bakterien (zelluläre Infektion) behandelt und die Auswirkungen auf das Proteom wird analysiert. Unterschiede im Vergleich zur Behandlung mit gereinigten Toxinen sollen herausgearbeitet werden und könnten Hinweise auf weitere unbekannte bakterielle Faktoren sein, die zusätzlich zu den bekannten Hauptpathogenitätsfaktoren ToxinA und B wirken.

Clostridien Zytotoxine mono-Glyosylieren Rho-Proteine and bewirken so eine inaktivierung dieser essentiellen Regulatoren des Zytoskelets and andder zellulärer Funktionen Wie GenRegulation，Zell-Zyklus-Kontrolle and Zelltod.Dass im Berichtszeitraum duchgeführten arbeitenüber die Wirkungen dieser toxine auf das Proteom von Zielzellen zeigten，dass约40 weitere Proteine oxx-abhängig in Ihrer zellulären Konzenteration verändert.这是一种潜在的毒物突变者，它的特征是它的形态特征。在所有的项目中，这些项目都是这样的，嗯，这些都是他们的工作。大足山绿地实验植物。A)在新的LC-MS系统中分析蛋白质，B)在蛋白质的LC-MS质谱仪中检测蛋白质，B)在蛋白质的LC-MS定量分析中检测到蛋白质，C)在蛋白质和毒素(野生型毒素)中检测蛋白质。他说：“这是一件很重要的事情，我不知道该怎么做。对难辨梭状芽胞杆菌进行了检测，并对其进行了分析。他说：“我不知道这件事是怎么回事，但这是一件很重要的事情。”