ペプチド性伝達物質遊離に関与するシナプス膜蛋白質の同定と遊離機構の解明

参与肽递质释放的突触膜蛋白的鉴定及释放机制的阐明

基本信息

  • 批准号:
    08670112
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

脊髄後角組織の神経伝達物質に関与するシナプス蛋白質の存在を確認するため、ラット脊髄後角シナプトゾームを調整し、SDS-PAGE後、シナプトタグミン,シンタキシン,シナプトブレビン(VAMP), SNAP-25,シナプトフィジン、Rab3A、Rab3A/B/Cの抗体を用いてWestern blottingを行った。陽性コントロールとしてラットの大脳皮質膜シナプトゾーム画分を用いた。その結果、脊髄後角では1.基本的に大脳皮質に存在するシナプス蛋白質の存在が確認された、しかし、2.シナプトブレビン(VAMP)は、ほとんど検出できなかった、3.Rab3A、Rab3A/B/Cについては、脊髄のRab3Cが検出できなかった、4.シンタキシンのアイソフォームでは、Aタイプの存在が脊髄では確認できなかった。以上、脊髄後角でのシナプス蛋白質の分布が大脳皮質のそれらとは異なり、脊髄後角でペプチド性神経伝達物質を含有しているシナプスには、脊髄特異的なシナプス蛋白質が存在し、遊離を制御している可能性が示唆された。一方、ラット後根神経節初代培養細胞から刺激に応じてサブスタンスPが遊離することを確認し、複数の遊離制御機構の存在すること可能性を明らかにした。後根神経節初代培養細胞では、培養条件特にNGF (nerve growth factor)によりサブスタンスPの生合成が制御されていることもサブスタンスP合成酵素のmRNAの定量で明らかになった。
After SDS-PAGE, Western blotting was performed for antibodies to spinal dorsal horn tissue, SNAP-25, Rab3A, Rab3A/B/C, VAMP (VAMP), SNAP-25, Rab3A, Rab3A/B/C. The positive cells are divided into two groups: the cortex and the cortex. 1. The presence of protein in the basal cortex was confirmed; 2. The presence of protein in the basal cortex was confirmed; 3. Rab3A, Rab3A/B/C was confirmed; 4. The presence of protein in the basal cortex was confirmed. The distribution of protein in the dorsal horn of the spine is different from that in the dorsal horn of the spine, and the possibility of the existence and free control of protein in the dorsal horn of the spine is indicated. The possibility of the existence of a plurality of dissociative control mechanisms was confirmed when the primary cultured cells of the root ganglion were stimulated. The expression of NGF (nerve growth factor) mRNA in primary culture cells of posterior ganglion was determined by quantitative analysis of NGF mRNA.

项目成果

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专利数量(0)
Atsuko Inoue: "5-Hydroxytryptamine-facilitated release of substance P from rat spinal cord slices is mediated by nitric oxide and cyclic GMP" Journal of Neurochemistry. 68 (1). 128-133 (1997)
Atsuko Inoue:“5-羟色胺促进大鼠脊髓切片中 P 物质的释放是由一氧化氮和环 GMP 介导的”《神经化学杂志》。
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    $ 1.34万
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