ピルビン酸キナーゼアイソザイム遺伝子の転写とスプライシングを制御する因子

控制丙酮酸激酶同工酶基因转录和剪接的因素

• 批准号: 08670142
• 负责人: 野口 民夫
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670142/
• 关键词: ピルビン酸キナーゼ遺伝子; NF1ファミリー; HNF4; 選択的スプライシング

1. ピルビン酸キナーゼ(PK)L遺伝子の炭水化物応答性転写制御領域を構成するLIIにHNF4とNF1ファミリー(NF1LとNF1/Red1)が結合するが,これらはLIIの重複する配列に結合することにより拮抗的に作用することを見いだした.すなわち,HNF4は転写活性を上げるのに対し,NF1LやNF1/Red1はHNF4の作用を抑制する.また,NF1ファミリーはS14遺伝子の炭水化物応答性領域のアクセサリー部位に結合するが,HNF4は結合しないことも明らかにした.したがって,NF1ファミリーはこれらの遺伝子の炭水化物応答性に対する補助因子として機能する可能性が考えられる.2. PKL遺伝子の転写制御領域のLIIIに作用する転写因子として,ホメオボックスタンパク質のHEXを酵母での遺伝的選択法を使って同定したが,大腸菌で発現させたHEXはLIIIには結合しなかった.しかし,LIIに結合するHNF4やLIに結合するHNF1の活性を上昇させることが見いだされた.HEXはこれらの領域に直接に結合しないので,タンパク質間相互作用によりHNF4やHNF1の活性に影響を与えているものと考えられる.3. PKM遺伝子転写産物の選択的スプライシングに関与するシスエレメントの同定を行った.その結果,肝癌細胞でのエキソン9の除去とエキソン10の選択に関与するエレメントがエキソン9の3′側とイントロン9の5′側の領域かエキソン10とイントロン10の相当する領域に存在することを示した.4. PKM遺伝子の転写制御領域のC領域に結合する転写因子のクローニングを酵母での遺伝的選択法を使って試みているが,まだ成功していない.

1. LII HNF4 and NF1 (NF1L and NF1/Red1) are linked to each other, and LII is linked to each other. NF1 L and NF1/Red1 inhibit the action of HNF4. The NF1 gene is bound to the S14 gene and the HNF4 gene is bound to the S14 gene and the HNF4 gene. The NF1 gene is responsible for the response of the hydrocarbon to the NF1 gene. The NF1 gene is responsible for the response of the NF1 gene to the NF1 gene. PKL gene expression control domain LIII function of the gene expression factor, the selection method of HEX gene expression in yeast gene expression to determine the same, Escherichia coli expression of HEX gene expression LIII. HNF4 and HNF1 activity increased due to LII binding.HEX activity increased due to direct binding. PKM gene expression product selection and selection of different types of products related to different types of products. As a result, it is shown that the removal of exon 9 and the selection of exon 10 in liver cancer cells are related to the existence of exon 10 and exon 10 in the equivalent field of exon 10 and exon 10 in the 3 'side of exon 9 and the 5' side of exon 9. 4. PKM gene coding control domain C domain in combination with the coding factor of the selection method of yeast gene coding to make the test, successfully.

项目成果

Yamada,K.: "Members of the nuclear factor 1 family and hepatocyte nuclear factor 4 bind to overlapping sequences of the L-II element on the rat pyruvate kinase L gene promoter and regulate its expression." Biochem.J.(in press).

Yamada,K.：“核因子 1 家族和肝细胞核因子 4 的成员与大鼠丙酮酸激酶 L 基因启动子上 L-II 元件的重叠序列结合并调节其表达。”

Kang,R.: "Relationship between the concentrations of glycolytic intermediates and expression of the L-type pyruvate kinase gene in cultured hepatocytes." J.Biochem.119. 162-166 (1996)

Kang,R.：“培养肝细胞中糖酵解中间体的浓度与 L 型丙酮酸激酶基因表达之间的关系。”

Takenaka,M.: "Alternative splicing of the pyruvate kinase M gene in a minigene system." Eur.J.Biochem.235. 366-371 (1996)

Takenaka,M.：“小基因系统中丙酮酸激酶 M 基因的选择性剪接。”