肝臓の発生と分化におけるホメオボックスタンパク質Hexの役割

同源盒蛋白 Hex 在肝脏发育和分化中的作用

• 批准号: 01F00128
• 负责人: 野口 民夫
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01F00128/
• 关键词: Hex; ジーンターゲティング; 転写制御; ドミナントネガティブミュータント; FGF; 肝発生

1.Hex遺伝子のコンディショナルノックアウトマウスの作製。分化した成熟肝細胞におけるHexの役割を明らかにするために、Cre/loxPシステムを利用したHexのコンディショナルノックアウトマウスの作製を行っている。ターゲティングベクターと相同組み換えを起こした3種類のESクローンを得ており、このうち1種類のES細胞からキメラマウスを得た。現在、F1マウスを作製中である。2.ドミナントネガティブHexを用いた解析。Hexは転写の活性化と抑制の両方に作用するが、転写活性化に関与する領域がホメオドメインよりもC末側にあることを見いだした。このC末側を除いたミュータントはHexによる転写活性化に対しドミナントネガティブミュータントとして作用すること示した。アデノウイルスをベクターとしてこのミュータントを肝細胞に発現させ、その影響を調べた。その結果、Hexによって正に制御されることが知られているNa依存性胆汁酸共輸送体遺伝子の発現が抑制されることが判明した。更にマイクロアレイで網羅的に解析したところ、20種類以上の遺伝子の発現が影響を受けることが示唆された。3.肝発生におけるFGFとHexの関係。FGFは内胚葉からの肝細胞の発生を促す細胞外シグナルであるが、その標的となる細胞内因子は知られていない。そこで、内胚葉の培養系を用いて、FGFのHex遺伝子の発現に及ぼす影響を検討した。その結果、FGFは直接にはHex遺伝子の発現を制御しないことが判明した。

1. Produced by Hex 伝子のコンディショナルノックアウトマウスの. Differentiated mature liver cells, Hex, Hex, Cut, Ming, Cre/loxPステムを utilizes したHexのコンディショナルノックアウトマウスの to make を行っている.ターゲティングベクターと Same group みchange えを开こした 3 types のESクローンを得ており、このうち1 kind of ES cells からキメラマウスを得た. Currently, F1 Masako is under production. 2. ドミナントネガティブHexを Use いた to analyze. Hex means activation and inhibition of Hex. Function and activation of Hex. With the field of がホメオドメインよりもC end side にあることを见いだした.このC terminal side をexcept いたミュータントはHex による転write activation に対しドミナントネガティブミュータントとしてeffect することshowした.アデノウイルスをベクターとしてこのミュータントをLiver cellに発appearsさせ、そのeffectを Adjustmentべた.そのResults, Hexによって正にcontrolされることが知られているNa-dependent bile acid co-transporter body remains 伝子の発 appear が inhibit されることが clarified した. More analysis of the にマイクロアレイで snare, and more than 20 types of の缝子の発appearance are affected by the けることが说唆された. 3. Liver disease is related to the relationship between FGF and Hex. FGF is an endodermal factor that promotes the development of liver cells and promotes extracellular growth.そこで, endoderm culture system を いて, FGF のHex legacy 伝子の発appear に and ぼ す を検した. The result of その, FGF は direct にはHex 伝子の発appears をcontrol しないことが clarifies した.

项目成果

Kikkawa, E.: "Sp family members stimulate the transcription of Hex gene via interactions with GC boxes"J.Biochem. (Tokyo). 130・6. 885-891 (2001)

Kikkawa, E.：“Sp 家族成员通过与 GC 盒的相互作用刺激 Hex 基因的转录”J.Biochem.（东京）130·6（2001）。

Fukuda, H.: "Transcriptional Regulation of insulin receptor gene promoter in rat hepatocytes"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 280・5. 1274-1278 (2001)

Fukuda，H.：“大鼠肝细胞中胰岛素受体基因启动子的转录调节”Biochem.Biophys.Res.Commun. 280・5（2001）。

Asai, Y.: "Insulin stimulates expresson of the pyruvate kinase M gene in 3T3-L1 adipocytes"Biosci.Biotechnol.Biochem.. (in press). (2003)

Asai, Y.：“胰岛素刺激 3T3-L1 脂肪细胞中丙酮酸激酶 M 基因的表达”Biosci.Biotechnol.Biochem..（出版中）。

山田一哉: "転写因子Sterol Regulatory Element-Binding Protein(SREBP)と糖質・脂質代謝"日本栄養・食糧学会誌. 55・1. 45-50 (2002)

Kazuya Yamada：“转录因子甾醇调节元件结合蛋白（SREBP）与碳水化合物和脂质代谢”日本营养与食品科学学会杂志55・1（2002）。