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非受容体型転写因子の活性を制御する食品成分の検索

寻找控制非受体转录因子活性的食品成分

基本信息

批准号：
15658042
负责人：
野口民夫
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

1、ChREBP/Mlx cDNAのクローニング解糖系のL型ピルビン酸キナーゼ遺伝子や脂肪酸合成系の脂肪酸合成酵素遺伝子の炭水化物応答領域に結合する転写因子として見いだされたChREBPは、非受容体型転写因子でMlxと二量体を形成して作用する。両因子のcDNAをRT-PCR法によりクローニングし、L型ピルビン酸キナーゼ遺伝子のプロモーターをレポーターとして活性を調べたところ、レポーター活性を促進することが認められた。2、SREBP1やChREBP/Mlxの活性を制御する食品成分の検索非受容体型転写因子であるSREBP1の標的遺伝子としてATP-クエン酸リアーゼを、ChREBP/Mlxの標的遺伝子として上記のL型ピルビン酸キナーゼをそれぞれ用い、これらのプロモーターをレポーターとして、食品のなかにこれらの転写因子の活性に影響を与えるものがあるかどうかを検討した。これまで約30種類の野菜や果物の抽出物を調べたが、活性を有意に変動させるものは見いだされなかった。3、ChREBP遺伝子の発現調節ChREBP遺伝子の発現に影響を与えるものも結果としてChREBP活性に影響を与えるので、発現調節機構を検討した。初代培養肝細胞を用い、インスリンやグルコースを始めとする種々の炭水化物のChREBPmRNAに対する影響を調べたところ、ChREBP遺伝子の転写は、ChREBP自身によって制御されることが強く示唆された。そこで、ラットChREBP遺伝子を単離し、転写開始点上流約1kbまでの領域の配列を調べたところ、ChREBP結合配列に類似した配列が見いだされたが、この配列はChREBPに応答しなかった。また、SREBP結合配列に類似した配列も見いだされ、この配列はSREBPに応答した。

1. ChREBP/Mlx cDNA is a novel gene that binds to the L-type of glucose-degrading enzyme and the L-type of fatty acid-synthesizing enzyme in the carbohydrate domain. ChREBP is a novel gene that binds to the non-receptor type of Mlx. The cDNA of the gene was amplified by RT-PCR, and the activity of the gene was enhanced. 2. SREBP1 and ChREBP/Mlx activity control factors in food composition analysis are discussed in relation to the activity of SREBP1 target gene and ATP-4 target gene, ChREBP/Mlx target gene and L-4 target gene. The extracts of about 30 kinds of wild vegetables are regulated and activated intentionally. 3. To investigate the regulation mechanism of ChREBP gene expression and its effect on ChREBP gene expression. The use of primary cultured hepatocytes to modulate the impact of ChREBP mRNA in various carbohydrates such as linens and cells has been demonstrated by the fact that the expression of ChREBP gene is not controlled by ChREBP itself. The ChREBP gene is separated from the ChREBP gene by about 1kb upstream from the start point. The ChREBP gene is combined with the ChREBP gene by about 1 kb upstream. The SREBP combination is similar to the SREBP combination.