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肝細胞の発生と分化を司る遺伝子システムにおけるHexの役割の解明

阐明 Hex 在控制肝细胞发育和分化的遗传系统中的作用

基本信息

批准号：
12206040
负责人：
野口民夫
金额：
--
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12206040/
关键词：
Hex ホメオボックス遺伝子肝細胞発生 Sp1 Sp3 分化

项目摘要

本研究は肝細胞の発生と分化を司る遺伝子システムにおけるHex遺伝子の役割を解明するとともに、そのシステム全体を明らかにすることを目的として、以下の点を検討した。1、Hexの標的遺伝子の同定Hexを発現していない未分化型肝がん細胞株のdRLh84にHexの発現プラスミドを導入して恒常的に過剰発現する複数の細胞株を単離した。これらの細胞では肝臓の分化にかかわると考えられるHNF1αやHNF4αの発現が2〜3倍上昇していた。さらに、この過剰発現細胞を利用し、PCRサブトラクション法により標的遺伝子群の同定を試みている。2、Hex遺伝子の転写調節因子レポーターアッセイの結果、-199までの領域に存在する4箇所のGCボックスがHex遺伝子の肝細胞でのプロモーター活性に重要であった。これらのボックスにはSpファミリーに属する転写因子のSp1やSp3が結合し、ともに転写活性を上昇させたが、Sp1の作用の方が強かった。しかし、これだけでHex遺伝子の組織特異的発現を説明できず、現在、トランスジェニックマウスを用いて-199までの領域のin vivoでの機能を解析中である。3、Hexと相互作用するタンパク質の同定イーストツーハイブリドシステムを用いて試みている。また、レポーターアッセイで、HexがHNF1αやHNF4αの転写活性化能を上げることを見いだしたので、これらの転写因子間の相互作用を解析している。

The purpose of this study is to investigate the development and differentiation of hepatocytes and the role of hepatocytes in the development and differentiation of hepatocytes. 1. The target gene of Hex was expressed in the undifferentiated liver cell line dRLh84. The expression of Hex was introduced into the undifferentiated liver cell line dRLh84. The expression of Hex in the undifferentiated liver cell line dRLh84 was detected in the undifferentiated liver cell line dRLh84. The expression of HNF1 α and HNF4 α increased by 2 ~ 3 times. In this paper, we try to identify the target gene group by PCR and PCR. 2. Hex gene regulatory factors are important for the activity of Hex gene in liver cells. In this case, Sp1 and Sp3 are the binding factors, and Sp2 and Sp3 are the active factors. The tissue-specific occurrence of Hex gene is explained in this paper. The function of Hex gene in vivo is analyzed in this paper. 3. Hex interaction: the interaction between Hex and Hex is the same as that between Hex and Hex. The interaction between HNF1 α and HNF4 α was analyzed.