ジフテリア毒素リセプター複合体の解析

白喉毒素受体复合物的分析

• 批准号: 08670327
• 负责人: 岩本 亮
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670327/
• 关键词: ジフテリア毒素; ジフテリア毒素リセプター; DRAP27; CD9; インテグリンα3β1

ジフテリア毒素リセプター(DTR)複合体構成未知因子の探索これまでのわれわれの研究から、DTRには、その活性を制御する膜蛋白質DRAP27/CD9及び細胞接着分子インテグリンα3β1がアソシエ-トして複合体を形成していることが明らかとなっているが、さらにこの複合体に別の複数の蛋白質が含まれることが、われわれのDTRに対するクロスリンク実験などから示唆されていた。そこで本年度はDTR複合体に含まれる未知の蛋白質の同定とDTR活性発現における機能の解析を目的として研究を開始した。まずDTRと共沈降する蛋白質を特異的に認識するモノクローナル抗体の作製を行なった。DTRを高発現しているサル腎由来Vero細胞の膜分画をマウスに免疫して、その脾臓B細胞からハイブリドーマを作製した。そしてVero細胞のライセ-トをジフテリア毒素(DT)及び抗DT抗体で免疫沈降したときの沈降物を特異的に認識するような抗体を産生するハイブリドーマのスクリーニングを行ない、複数のクローンを得た。これらのなかの一つで1C9-2と名付けたモノクローナル抗体の認識する抗原(分子量約19kDa)は、抗DTR抗体よりもDTを用いた免疫沈降においてのほうが、DTRとの共沈降が強く観察された。抗DTR抗体が複合体を形成していないフリーのものも含む全てのDTRに結合するのに対し、DTがCD9と複合体を構成しているDTRにのみ結合することを考えあわせると、1C9-2抗原もDTR活性に関与する新たな複合体構成因子であることが強く示唆された。現在この分子のcDNAのクローニングを行なっているところである。

ジ フ テ リ ア toxin リ セ プ タ ー (DTR) complex composition unknown factor の explore こ れ ま で の わ れ わ れ の research か ら, DTR に は, そ の を active suppression す る DRAP27 / CD9 and び cell membrane protein and molecular イ ン テ グ リ ン alpha 3 beta 1 が ア ソ シ エ - ト し て complex を form し て い る こ と が Ming ら か と な っ て い る が, さ ら に こ の complex に don't の plural が の protein contains ま れ る こ と が, わ れ わ れ の DTR に す seaborne る ク ロ ス リ ン ク be 験 な ど か ら in stopping さ れ て い た. そ こ で this year は DTR complex contains に ま れ の る の unknown proteins might be と DTR active 発 now に お け る function analytical を の purpose と し て research を start し た. ま ず DTR と total sink す る protein を specific に know す る モ ノ ク ロ ー ナ ル を line the antibody の cropping な っ た. DTR を high 発 now し て い る サ ル の renal origin Vero cell membrane points draw を マ ウ ス に immune し て, そ の splenic B cells か ら ハ イ ブ リ ド ー マ を cropping し た. そ し て Vero cell の ラ イ セ - ト を ジ フ テ リ ア toxin (DT) and び で DT antibody immune resistance sink し た と き の sink content を specific に know す る よ う antibodies な を す る ハ イ ブ リ ド ー マ の ス ク リ ー ニ ン グ を line な い, plural の ク ロ ー ン を た. こ れ ら の な か の a つ で 1 c9-2 と name pay け た モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody の know す る antigen (molecular weight about 19 kda) は, DTR antibody よ り も DT を with い た immune sink に お い て の ほ う が, DTR と の total sink が strong く 観 examine さ れ た. Resistance to DTR antibody が complex を form し て い な い フ リ ー の も の も contain む total て の DTR に combining す る の に し seaborne, DT が CD9 と complex を constitute し て い る DTR に の み combining す る こ と を exam え あ わ せ る と, 1 c9-2 antigen も DTR activity に masato and す る new た な complex form factor で あ る こ と が strong く business さ Youdaoplaceholder0. Now the <s:1> <s:1> molecule cDNA cdna cdna ロ ニ ニ グを グを グを グを グを グを line なって ると ると ろである ろである

项目成果

Yasuhiro Nakamura, Ryo Iwamoto, and Eisuke Mekada: "Expression and distribution of CD9 in Myelin of the central and peripheral nervous systems." Am. J. Pathol.149. 575-583 (1996)

Yasuhiro Nakamura、Ryo Iwamoto 和 Eisuke Mekada：“CD9 在中枢和周围神经系统髓磷脂中的表达和分布。”

岩本亮、目加田英輔: "ジフテリア毒素" 実験医学 増刊 GTP結合蛋白質. 14・2. 292-293 (1996)

Ryo Iwamoto，Eisuke Mekada：“白喉毒素”实验医学特刊 GTP 结合蛋白 14・2（1996）。