ジフテリア毒素リセプターの機能をモジュレートする細胞側因子の解析

调节白喉毒素受体功能的细胞因素分析

• 批准号: 06770213
• 负责人: 岩本 亮
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770213/
• 关键词: ジフテリア毒素; HB-EGF; DRAP27; CD9; リセプター

本研究は、ジフテリア毒素のリセプターとの結合及び細胞内侵入における細胞側の因子、特にリセプターとアソシエ-トする膜蛋白質DRAP27に焦点を当て、DRAP27の毒素リセプターに対する機能の解析を目的とした。毒素非感受性でDRAP27を発現していないマウスL細胞に、毒素リセプター(HB-EGF)のみ、又は毒素リセプター(HB-EGF)とDRAP27の両方を強制発現させ、各々の細胞について比較検討を行った。まず、DRAP27の発現によって、細胞表面へのジフテリア毒素の結合数並びに毒素感受性が著しく上昇することを確認した。この時毒素とリセプターとの間のアフィニティーには変化は見られなかった。また、HB-EGFとDRAP27のタイトなアソシエーションが、免疫共沈降と化学架橋試薬を用いて示された。次に、DRAP27の発現による細胞の毒素結合数上昇が何に起因するかを検討したところ、HB-EGFのmRNA発現量、蛋白の寿命、HB-EGFの分泌量には差が見られなかった。さらには、抗HB-EGF抗体を用いた細胞表面への結合実験等から、DRAP27の発現の有無によって、細胞表面上のHB-EGF分子の数そのものにも差が見られないことが分かった。即ちこれらのことから、DRAP27は膜結合型のHB-EGFと細胞表面でタイトにアソシエ-トすることによって、HB-EGFを機能的な毒素リセプターに変換していることが示された。現在このメカニズムについてさらに詳しく解析中である。

This study aimed to elucidate the function of the membrane protein DRAP27, a cell-side factor, in particular, in the binding and intracellular invasion of the toxin. Toxin-insensitive DRAP27 was detected in L cells, HB-EGF was detected in HB-EGF, and DRP 27 was detected in HB-EGF under stress. The presence of TRAP 27, the binding of TRAP 27 to the cell surface, and the increase in the sensitivity of TRAP 27 to TRAP 27 were confirmed. This is the first time I've ever seen a woman. Hb-EGF and DRAP27 are used in immune co-precipitation and chemical bridging assays. In addition, the reasons for the increase of toxin binding number in cells with DRAP27 expression were discussed. The mRNA expression of HB-EGF, the life span of protein and the secretion of HB-EGF were also discussed. In addition, anti-HB-EGF antibodies were used to bind to the cell surface, and the presence or absence of DRAP27 was detected. The number of HB-EGF molecules on the cell surface was also detected. That is to say, DRAP27 is a membrane-bound HB-EGF toxin that can be transferred to the cell surface. Now, we're going to have to go through the analysis.