膜結合型細胞増殖因子によるジャクスタクラインとそれに関与する膜蛋白質の解析

膜结合细胞生长因子及其参与的膜蛋白分析近分泌

基本信息

  • 批准号:
    07780636
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.64万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

(1)proHB-EGFのジャクスタクライン活性の解析HB-EGFは膜結合型でジャクスタクライン細胞増殖活性を有することが明らかとなった。(2)CD9との複合体形成によるproHB-EGFのジャクスタクライン活性上昇proHB-EGF発現細胞にさらにCD9を導入し、proHB-EGFのみ発現する細胞とのジャクスタクライン細胞増殖活性の比較を行ったところ、CD9を発現している方が数十倍の活性の高さを示したことから、proHB-EGFは細胞表面でCD9と複合体を形成することによって膜結合型増殖因子として活性化されることが分かった。(3)proHB-EGF:CD9複合体とIntegrinα3β1とのアソシエーション表層ラベルしたVero細胞のライセ-トを抗CD9抗体で免疫沈降を行い共沈物を解析したところ、接着分子のIntegrinα3β1であることが明らかとなった。さらに同様のことをproHB-EGF高発現Vero細胞(Vero-H細胞)を用いて行ったところ、CD9を介してproHB-EGF、Integrinα3β1の三者が複合体を形成していることが明らかとなった。(4)proHB-EGF:CD9:Integrinα3β1複合体の細胞間接着部位における局在CD9、proHB-EGF、Integrinα3β1の三者それぞれのVero-H細胞における局在を、それぞれに対する抗体を用いて蛍光抗体を行い、共焦点レーザー顕微鏡で観察したところ、これら三者はいずれも細胞間接着部位にほぼ重なって局在することが分かった。これらのことから、proHB-EGFが膜結合型増殖因子としてジャクスタクラインにおいて機能するために、その活性を制御する膜蛋白質CD9、細胞接着分子Integrinα3β1の三者が複合体を形成し、細胞間接着部位において協調的に働いていることが示唆された。
(1) Analysis of proHB-EGF activity in cell proliferation of membrane-bound HB-EGF. (2) ProHB-EGF activity increases in CD9 complex formation and proHB-EGF production cells. Comparison of CD9 production and proHB-EGF production activity in CD9-induced and proHB-EGF-producing cells. proHB-EGF is activated by CD9 complex on the cell surface. (3)ProHB-EGF: CD9 complex and Integrin α 3 β1 complex are resolved by surface layer analysis of Vero cells and anti-CD9 antibodies. In Vero cells (Vero-H cells), proHB-EGF and Integrinα3β1 were used to form a complex of proHB-EGF, CD9 and Integrinα3β1. (4)ProHB-EGF: CD9:Integrinα3β1 complex in the cell-to-cell junction site is located in the CD9, proHB-EGF, Integrinα3β1 three pairs of Vero-H cells in the center, in the center. ProHB-EGF is a membrane-bound growth factor that regulates the function and activity of membrane protein CD9 and cell adhesion molecule Integrinα3β1.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Shigeki Higashiyama,et al: "The membrane protein CD9/RDAP27 potentiates the juxtacrine growth factor activity of the membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor" J.Cell Biol.,. 128. 929-938 (1995)
Shigeki Higashiyama 等人:“膜蛋白 CD9/RDAP27 增强膜锚定肝素结合 EGF 样生长因子的近分泌生长因子活性”J.Cell Biol.,。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kuniaki Nakamura,et al: "Membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor (HB-EGF) and diphtheria toxin receptor-associated protein (DRAP27/CD9) form a complex with Integrin a3b1 at cell-cell contact sites" J.Cell Biol.,. 129. 1691-1705 (1995)
Kuniaki Nakamura 等人:“膜锚定的肝素结合 EGF 样生长因子 (HB-EGF) 和白喉毒素受体相关蛋白 (DRAP27/CD9) 在细胞-细胞接触位点与整合素 a3b1 形成复合物”J.
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
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