マウス胃潰瘍粘膜における2型シクロオキシゲナーゼ酵素の役割に関する研究

2型环氧合酶对小鼠胃溃疡黏膜作用的研究

• 批准号: 08670588
• 负责人: 坂本 長逸
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670588/
• 关键词: 胃潰瘍; シクロオキシゲナーゼ-1; シクロオキシゲナーゼ2; シクロオキシゲナーゼ阻害剤

(1)マウス酢酸潰瘍の作製とcyclooxygenase(COX)-1,及びCOX-2遺伝子、蛋白発現、COX活性の測定マウス酢酸潰瘍作製後、潰瘍計数を潰瘍発症後5,10,20,30日後に測定した。潰瘍計数は5日後最大となり、以後漸減し30日で潰瘍は治癒した。潰瘍粘膜よりRNAを得、RT-PCR法にてCOX-1,COX-2遺伝子発現を判定量すると、COX-1遺伝子発現は正常胃粘膜と潰瘍胃粘膜で差を認めなかったが、正常胃粘膜で発現を認めないCOX-2遺伝子は潰瘍計数に一致して5日目で発現が最大となり、以後漸減し潰瘍治癒とともに発現は消失した。C-端特異抗体でCOX-2蛋白の発現をウエスタンブロットすると、正常胃粘膜では観察されないCOX-2蛋白発現を潰瘍発症後5日目の胃粘膜で認めた。14C-アラキドン酸を基質として潰瘍胃粘膜のCOX酵素活性を測定すると、COX-2遺伝子、蛋白発現に一致して潰瘍発症後5日目にCOX活性が増加した。従って潰瘍胃粘膜では正常では観察されないCOX-2遺伝子、蛋白発現が増加する結果COX活性が増加しプロスタグランジンの産生が増加するものと思われる。2)胃潰瘍粘膜におけるCOX-2の役割胃潰瘍粘膜で増加するCOX-2酵素蛋白の役割を明らかにするため、潰瘍発症後COX-2に特異的な阻害剤であるメタンスルフォンアニリド系化合物、NS-398をマウスに連日投与し潰瘍計数を測定した。NS-398は正常マウスに30日間連続投与しても胃粘膜傷害作用がなかった。一方、胃潰瘍マウスに連日投与すると、10,20,30日目の潰瘍計数は明らかにコントロールの潰瘍計数に比べ大きく、NS-398によるCOX-2の抑制は胃潰瘍治癒を遅延させることが示唆された。従って、胃潰瘍粘膜で発現増加するCOX-2は胃潰瘍の治癒に重要な役割をはたすものと思われる。

(1) cyclooxygenase (COX)-1, COX-2, albumen, COX activity assay, 5-month-old, 10-minute, 30-day follow-up tests were performed. The maximum number of patients will be counted after 5 days, and then they will be cured on the 30th day. Mucosal RNA, RT-PCR COX-1,COX-2, COX-1, normal gastric mucosa, normal gastric mucosa and normal gastric mucosa. The C-terminal specific antibody COX-2 protein showed that the normal gastric mucosa and normal gastric mucosa showed the presence of COX-2 protein in the first 5 days after the onset of symptoms. The activity of COX enzyme in gastric mucosa was assayed by enzyme assay, COX-2 enzyme activity, protein enzyme activity and COX activity were measured 5 days after the onset of the disease. The activity of COX was increased by the addition of COX-2 protein. The activity of COX was increased. 2) the mucous membrane of the stomach was excised by COX-2, and the mucous membrane was cut with COX-2 enzyme protein. After the disease, the blockage of COX-2, the daily dose of NS-398 and the determination of the number of drugs were measured. NS-398 was injected into the stomach on the 30th day, and the gastric mucosal injury was induced. On one side, the stomach is in contact with the doctor, and on the 20th and 30th of the day, the count is larger than that of the NS-398, and the treatment of the stomach is restrained by the COX-2. The mucous membrane of the stomach is very important for the treatment of the COX-2.

项目成果

Matsuda Kouhei: "Effects of growth factors and gul hormones on proliferation of primary cultured gastric mucous cells of guinea pig" J of Gastroenterology. 31・4. 498-504 (1996)

松田耕平：“生长因子和胃激素对豚鼠原代培养胃粘液细胞增殖的影响”《胃肠病学杂志》31・4（1996）。