T4ファージ収縮性尾部の分子間相互作用

T4噬菌体收缩尾的分子间相互作用

• 批准号: 13033009
• 负责人: 有坂 文雄
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13033009/
• 关键词: 感染機構; バクテリオファージ; X線結晶解析; 超遠心分析; 分子集合; リゾチーム; テイルリゾチーム; 収縮性尾部

T4ファージテイルリゾチーム(gp5)は生合成後まず3量体を形成し、その後Ser351とAla352の間でプロセッシング、即ち切断が起こる。Ser351を7種類の他のアミノ酸、即ち、Leu, Ala, Lys, Glu, Thr, Tyr, Hisに部位特異的置換を行った変位テイルリゾチームを発現させたところ、AlaおよびHis変異体が若干切断された以外はプロセッシングが全く起こらないことが分かった。このことは、プロセッシングが基質特異性の極めて高い大腸菌プロテアーゼによって行われていることを示している。この変異体のうち、Leu変異体をPurdue大学の金丸周司に依頼してgp27とのヘテロ複合体として結晶化し、構造決定を行うことに成功した。その結果、切断の起こる野生株では見えなかった15残基が姿を現し、この部分は外部に露出していることが分かったほか、gp5が3量体ではリゾチーム活性を持たない理由が、プロセッシングによるものではないことが分かった。即ち、3量体ではリゾチームドメインの基質認識部位が隣のサブユニットからのペプチドによって占められているが、これは切断されていない変異体でも全く同様であった。従って、リゾチーム活性の抑制はプロセッシングを必要としないことが分かった。驚いたことに、切断の起こらなくなった変異体も感染には全く支障がなかった。このことは、いままで活性の発現に必須であると思われていたプロセッシングが実は必須ではないことを示している。なお、変異体は感染能に関して野生型に較べて若干低温感受性がある。

After the synthesis of gp5, the body weight of T4 was measured and the weight was measured. After Ser351, the Ala352 was cut. The location of the special parts of Ser351 7, such as: Leu, Ala, Lys, Glu, Thr, Tyr, His, is very sensitive. The location of the device shows that there is a significant increase in the number of symptoms, such as the Ala, the His, and so on. In addition, the whole system is in operation. Please tell me that you have a lot of sex, and that you don't know what to do. In accordance with the crystallization of the complex, the crystallization of the complex and the success of the decision was made by the Department of Golden Maru of Purdue University, Leu and Purdue. The results were as follows: the results showed that the wild plants were cut off, the wild plants were cut off, the 15 residues were detected, the external parts of the plants were exposed, the body weight of the wild plants was measured, the activity was measured, and the reasons for the activity of the wild plants were measured. That is, to measure the body weight, to measure the size of the body, to know the position, to know, to cut off, to cut, to cut off, to cut off, to cut, to cut off, to It is necessary to restrain the activity of the drug, so that it can be divided into several parts. Please tell me that you are not infected with the whole barrier. If you want to see the activity, you have to think about it. You have to show it. The infection of the wild type can induce several hypothermic susceptibility.

项目成果

Toshiharu SUZUKI: "Adaptation of a thermophilic enzyme, 3-isopropylmalate dehydrogenase, to low temperatures"Protein Engineering. 14. 85-91 (2001)

Toshiharu SUZUKI：“嗜热酶 3-异丙基苹果酸脱氢酶对低温的适应”蛋白质工程。

有坂文雄: "T4ファージの自己集合におけるシャペロンの機能"ウイルス. 51・1. 57-61 (2001)

有坂文雄：“T4 噬菌体自组装中的分子伴侣的功能”病毒 51・1（2001）。

Li ZHAO: "P15 and P3, the Tail Completion Proteins of Bacteriophage T4, Both Form Hexameric Rings"J.Bacteriol.. 185. 1693-1700 (2003)

赵丽：“噬菌体 T4 的尾部完成蛋白 P15 和 P3，均形成六聚环”J. Bacteriol.. 185. 1693-1700 (2003)

金丸周司: "T4ファージの注射針複合体"生物物理. 43. 21-24 (2003)

Shuji Kanamaru：“T4 噬菌体针复合物”《生物物理学》43. 21-24 (2003)。

Shuji KANAMARU: "The Structure of the Bacteriophage T4 Cell-Puncuring Device"Nature. 415. 457-560 (2002)

Shuji KANAMARU：“噬菌体 T4 细胞穿刺装置的结构”自然。