色素性乾皮症A群マウスへのHVJリポゾームを用いた遺伝子治療

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HVJ-リポゾームを用いたXPA遺伝子治療の基礎としてXPA遺伝子を含有するHVJリポゾームをXPA群細胞およびXPAマウス細胞へ導入し、修復能の回復、細胞への傷害性の程度を分析し、XPA-HVJ-リポゾームの効果を評価した。サイトメガロウイルスのエンハンサーとβ-actionのプロモーターをもつpCAGGSにヒトXPAcDNAを組み込んだPCAGGS-XPA並びにpcDNA3のEcoRIサイトにXPA遺伝子を組み込みへマトアグルチニン遺伝子をつけたpcHA-XPAをXPAマウス細胞に遺伝子導入後24、48時間の修復能を調べた.pcHAはコントロールベクターpcDNA3に比して明らかに紫外線照射後のUDSの回復がみられ、ヒトXPA遺伝子がマウス細胞で働くことが確認された。24時間後と48時間後では24時間後の方が回復がよかった.PCAGGS-XPAも同様に遺伝子導入後UDSにより修復能の回復をみたが、pcHA-XPAの方が回復が良好であった.次に予め紫外線照射24時間前にXPA-HVJ-リポゾームをXPAマウスの背部皮膚に皮内径射しておき、太陽光近似のサンランプを用いて、UVBを4kJ/m^2同部に紫外線照射し、4時間後に皮膚を採取し固定した。紫外線照射後のビリミジンダイマー、(6-4)光産物の修復動態を、ピリミジンダイマー並びに、(6-4)光産物に特異的なモノクローナル抗体(金沢大学二階堂博士より供与)を用いて確認したところXPA-HVJリポゾームはコントロールリポゾームに比して、表皮、真皮ともにダイマー、(6-4)光産物の染色性は低かった.