色素性乾皮症A群マウスへのHVJリポゾームを用いた遺伝子治療

HVJ脂质体对着色性干皮病A组小鼠的基因治疗

• 批准号: 10153227
• 负责人: 錦織 千佳子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10153227/
• 关键词: HVJ-リポゾーム; 色素性乾皮症A群; 遺伝子治療; XPAマウス; 不定期DNA合成期(UDS); ピリミジンダイマー

HVJ-リポゾームを用いたXPA遺伝子治療の基礎としてXPA遺伝子を含有するHVJリポゾームをXPA群細胞およびXPAマウス細胞へ導入し、修復能の回復、細胞への傷害性の程度を分析し、XPA-HVJ-リポゾームの効果を評価した。サイトメガロウイルスのエンハンサーとβ-actionのプロモーターをもつpCAGGSにヒトXPAcDNAを組み込んだPCAGGS-XPA並びにpcDNA3のEcoRIサイトにXPA遺伝子を組み込みへマトアグルチニン遺伝子をつけたpcHA-XPAをXPAマウス細胞に遺伝子導入後24、48時間の修復能を調べた.pcHAはコントロールベクターpcDNA3に比して明らかに紫外線照射後のUDSの回復がみられ、ヒトXPA遺伝子がマウス細胞で働くことが確認された。24時間後と48時間後では24時間後の方が回復がよかった.PCAGGS-XPAも同様に遺伝子導入後UDSにより修復能の回復をみたが、pcHA-XPAの方が回復が良好であった.次に予め紫外線照射24時間前にXPA-HVJ-リポゾームをXPAマウスの背部皮膚に皮内径射しておき、太陽光近似のサンランプを用いて、UVBを4kJ/m^2同部に紫外線照射し、4時間後に皮膚を採取し固定した。紫外線照射後のビリミジンダイマー、(6-4)光産物の修復動態を、ピリミジンダイマー並びに、(6-4)光産物に特異的なモノクローナル抗体(金沢大学二階堂博士より供与)を用いて確認したところXPA-HVJリポゾームはコントロールリポゾームに比して、表皮、真皮ともにダイマー、(6-4)光産物の染色性は低かった.

XPA gene therapy is based on HVJ-1 gene therapy, XPA gene therapy contains HVJ-1 gene therapy, XPA gene therapy introduces XPA gene into XPA cells, repair energy recovers, and the degree of cell injury is analyzed. XPA-HVJ-1 gene therapy results are evaluated. XPA gene group: pcHA-XPA XPA is the only one that can be identified. After 24 hours and after 48 hours, the recovery time is 24 hours.PCAGGS-XPA is the same as UDS. After introducing UDS, the recovery time is 48 hours. PCHA-XPA is the same as UDS. Next, XPA-HVJ-1 was irradiated 24 hours ago, XPA was irradiated inside the skin of the back, sunlight was approximately irradiated, UVB was irradiated 4kJ/m^2, and the skin was fixed 4 hours later. After UV irradiation, the recovery dynamics of (6-4) photoproducts,(6-4) photoproduct-specific antibodies (provided by Ph.D., Second Order Hall, Kanazawa University) were confirmed by the use of XPA-HVJ photoproducts,(6-4) photoproduct-specific antibodies,(6- 4) photoproduct-specific antibodies,(6-4) photoproducts, and (6- 5) photoproducts.