オリゴデンドロサイトの発生における移動と軸索との相互作用の解析

少突胶质细胞发育过程中的迁移和与轴突相互作用的分析

• 批准号: 10156228
• 负责人: 小野 勝彦
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Shimane Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10156228/
• 关键词: 細胞接着分子; ニワトリ胚; 細胞移動; 単クローン抗体; 組織片培養; N-カドヘリン; β1インテグリン

オリゴデンドロサイトは、発生の過程で脳や脊髄の限局した部位で分化し機能する場所に向かって移動する。その移動の様式については、ニワトリ胚の神経組織に単クローン抗体04を用いて免疫染色することにより示すことができる。軸索抗原に対する抗体と04とを用いて二重染色を行うと、移動中のオリゴデンドロサイト(の前駆細胞)は、しばしば軸索に沿って平行に配列していた。したがって、その移動に対して軸索が何らかのガイドの働きをしていることが形態学的に示唆された。そこで、オリゴデンドロサイトの移動における細胞表面分子を介した軸索との相互作用を調べることを目的として実験をおこなった。ふ卵6日目のニワトリ胚の後脳や脊髄の細胞を2-3日培養して04陽性(04+)細胞に発現している細胞表面分子を免疫組織化学的に調べた。その結果、90%以上の04+細胞にNCAMが発現しており、N-カドヘリンは80%程度の、β1インテグリンは70%程度の04+細胞にみられた。次に、ふ卵6日目のニワトリ胚脊髄の組織片をラミニン/フィブロネクチンをコートした上で培養すると3日後には突起の伸長とともに、多くの04+細胞が組織片から遊走して出てくる。この培養系に細胞接着分子に対する抗体を用いて、細胞移動や突起伸長に対する影響を調べた。その結果、β1インテグリンに対する抗体を加えた場合には、突起伸長や細胞の遊走がさまざまな程度で阻害されたが、NCAMやN-カドヘリンに対する抗体を加えた場合には、変化はわずかしか認められなかった。以上の結果より、オリゴデンドロサイトの移動にはβ1インテグリンが関与している可能性が示された。今後は、生体内(ニワトリ胚)への抗体注入による細胞移動への作用を調べる。

オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト は, 発 の process で 脳 や spinal marrow の limit bureau し た parts で す し function differentiation に る places to か っ て mobile す る. そ の mobile の others type に つ い て は, ニ ワ ト リ embryo の god 経 organization に 単 ク ロ ー 04 を ン antibody with い て immune dyeing す る こ と に よ り shown す こ と が で き る. Axon antigen に す seaborne る antibody と 04 と を with い て line double staining を う と, moving の オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト 駆 cells) before (の は, し ば し ば axon に along っ て parallel に match column し て い た. し た が っ て, そ の mobile に し seaborne て axon が what ら か の ガ イ ド の 働 き を し て い る こ と が morphology に in stopping さ れ た. そ こ で, オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト の mobile に お け る cell surface molecule を interface し た axon と の interaction を adjustable べ る こ と を purpose と し て be 験 を お こ な っ た. ふ egg 6 mesh の ニ ワ ト リ after embryo の 脳 や spinal marrow cells の を 2-3 training し て 04 positive (4 +) cells に 発 now し て い る cell surface molecules を immunohistochemical に adjustable べ た. そ の results, more than 90% の 04 + cells に NCAM が 発 now し て お り, N - カ ド ヘ リ ン の は 80% degree, beta 1 イ ン テ グ リ ン は 70% degree の 04 + cells に み ら れ た. に, 6 mesh の ふ eggs ニ ワ ト リ embryo spinal marrow の tissue slice を ラ ミ ニ ン / フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン を コ ー ト し た nurturing で す る と 3 later に は protuberant の elongation と と も に, multiple く の 04 + cells が tissue slice か ら wander し て out て く る. こ の culture cell に then molecular に す seaborne を る antibody with い て, cellular mobile や protuberant elongation に す seaborne る influence を adjustable べ た. そ の results, beta 1 イ ン テ グ リ ン に す seaborne る antibody を plus え た occasions に は, protuberant elongation や cells の が さ ま ざ ま な degree で resistance against さ れ た が, NCAM や N - カ ド ヘ リ ン に す seaborne る antibody を plus え た occasions に は, - は わ ず か し か recognize め ら れ な か っ た. の above results よ り, オ リ ゴ デ ン ド ロ サ イ ト の mobile に は beta 1 イ ン テ グ リ ン が masato and し て い が る possibility in さ れ た. In the future, へ and in the body (ニワトリ embryo)へ <s:1> antibodies are injected into による cells to move へ <s:1> and act on を to regulate べる.

项目成果

Miller and Ono: "Morphological analysis of the early stages of oligodendrocyte development in the vertebrate central nervous system" Microscopy Research and Technique. 41・5. 441-453 (1998)

Miller 和 Ono：“脊椎动物中枢神经系统少突胶质细胞发育早期的形态分析”显微镜研究和技术 41・5（1998）。

Ono et al.: "Developmental appearance of oligodendrocytes in the embryonic chick retina" Journal of Comparative Neurology. 398・3. 309-322 (1998)

小野等人：“胚胎鸡视网膜中少突胶质细胞的发育外观”《比较神经学杂志》398・3（1998）。