权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

エンドソーム・リソソーム系蛋白分解機構におけるカテプシンEの役割

组织蛋白酶E在内体-溶酶体蛋白降解机制中的作用

基本信息

批准号：
10163229
负责人：
山本建二
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

カテプシシEはカテプシンDとともに動物細胞における主要な細胞内アスパラギン酸プロテアーゼである。筆者らはこれまでの一連の研究から、カテプシンEが非リソゾーム性酵素として限定的な分布をし、組織・細胞によって細胞膜型または細胞質型、あるいはその両方の存在様式をとることを明らかにした。また、カテプシンEは粗面小胞体上のリボゾームで合成された後、古典的分泌経路でゴルジ野に運ばれ二量体を構成することが示めされたが、その最終局在部位が細胞種によって異なるため、その選別・輸送および活性分子への変換機構については殆ど未解明のままであった。前年度の研究から、カテプシシEは最終的にはエンドソーム・リソソーム蛋白分解システムに寄与するこが示唆されたものの、多くの細胞では本酵素は成熟型酵素まで変換されておらず、活性化部位である酸性コンパートメントへも輸送されていないことが示されている。そこで本年度の研究では、NRK細胞に野生型および各種変異を導入したカテプシンE分子を発現させ、酸性コンパートメント以外の部位でのリテンション機構や活性化へのシグナル機構を詳細に解析した。NRK細胞に発現させた野生型カテプシンEはもっぱら小胞体に局在し、高マンノース型糖鎖をもつプロ型酵素であった。この細胞をSH還元剤で処理すると本酵素の大部分が小胞体から消失し細胞外へ分泌された。小胞体に局在するプロ分子は単量体として存在することから、本酵素の二量体を形成するための47番目のシステイン残基が小胞体に貯留するために重要であることが示唆された。また、このシステイン残基を含むプロ部分を欠いた変異体が小胞体に局在せず細胞外に検出されることからも、このシステイン残基を介した本酵素の小胞体貯留機構が示唆された。糖鎖を欠損させた変異体を発現させてもNRK細胞での局在には変化は見られず、小胞体での貯留には糖鎖は重要ではないことが示された。

This is the first time that the animals have been killed in the first place, and that there is no significant difference between the two. In the first part of the study, the distribution of non-enzymatic enzymes was determined, and the cell membrane type was detected. There is a formula for the existence of a formula for the study. After the synthesis of the enzyme on the rough-faced small cell body, the classical secretory pathway, the biosome, the biosome, the enzyme, the cell, the In the previous year, the most active parts of the study, such as protein decomposition, proteolysis, mature enzymes, mature enzymes, and activated parts, were detected in the previous year, and the active parts were not found in the previous year. In this year's study, all kinds of wild-type NRK cells have been used to detect the presence of E. coli molecules in all kinds of cells, while those in other parts of the world have been activated by the organization of the laboratory. NRK cells showed that wild-type, high-type, low-level, high-type, high-type, low-level, high-type, low-level, high-level, high-type, low-level, high-type, low-level, high-type, high-type, Most of the small cell bodies disappear and the extracellular secretion of this enzyme is mainly caused by SH. Small cell bodies exist in small cell bodies in the presence of molecules and molecules, and the formation of binary bodies of this enzyme is caused by the formation of small cell bodies in the presence of small cell bodies. The residue of the enzyme was detected in the extracellular domain of the cell, and the residue of the enzyme was introduced into the body of the enzyme. The glucose deficit is not good enough to show that the NRK cells are not in good condition, and that the small cell bodies are important.