プラスチドの光合成関連遺伝子mRNAの新たな翻訳抑制機構(RNAプロセシングの影響と翻訳産物によるフィードバック制御機構)

质体中光合作用相关基因mRNA的新翻译抑制机制（RNA加工的影响和翻译产物的反馈控制机制）

• 批准号: 10170214
• 负责人: 廣瀬 哲郎
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10170214/
• 关键词: 葉緑体; 翻訳; RNAプロセシング; RNAエンディティング; in vitro系

今年度は葉緑体RNAプロセシングと翻訳間での相互作用、また翻訳産物による翻訳フィードバック機構を明らかにするために以下のような解析を行った。1. RNAエディティングと翻訳間の相互作用を明らかにするために、タバコ葉緑体psbL mRNAを基質としin vitro RNAエディティング系、in vitro翻訳系による解析を行った。まず葉緑体抽出液を用いてin vitroで正確なRNAエディティング反応が行われる条件を詳細に検討し効率よく再現性の高い系を構築した。この系を用いて変異mRNAによる解析を行い、エディティング部位上流16ntの領域がエディティングに重要であり、さらに競争阻害実験によってこの領域にトランス因子が相互作用することが明らかになった。16ntからなる領域をスキャニング変異を導入したところ全ての変異RNAにおいてエディティング反応が起こらなかったことからl6nt全体が重要であることが明らかになった。同様の変異mRNAによりin vitro翻訳系によりpsbL mRNAの翻訳制御領域を解析した結果、翻訳にも上流16ntの領域が重要であることが明らかになり、エディティングと翻訳のシス配列がオーバーラップしていることが明らかになった。この系を用いることによりエディティング因子と翻訳因子の順序だったmRNAとの相互作用機構が明らかになると期待される。2. 光合成関連遺伝子の発現過程で見られる翻訳フィードバック機構を明らかにするために光合成産物が存在しない非光合成培養細胞由来の色素体抽出液からin vitro翻訳系を開発した。

Our は chloroplast RNA プ ロ セ シ ン グ と flip between 訳 で の interaction, ま た turn 訳 product に よ る turn 訳 フ ィ ー ド バ ッ ク institutions を Ming ら か に す る た め に following の よ う な parsing line を っ た. 1. RNA エ デ ィ テ ィ ン グ と の interaction between turn 訳 を Ming ら か に す る た め に, タ バ コ chloroplast psbL mRNA を matrix と し in vitro RNA エ デ ィ テ ィ ン グ, in vitro turn 訳 に よ る parsing line を っ た. ま ず chloroplast extract を with い て in vitro で な RNA right エ デ ィ テ ィ ン グ anti 応 が line わ れ を る conditions detailed に beg し 検 sharper rate よ く high reproducibility の い department を build し た. こ の is を with い て - different mRNA に よ る parsing を い, エ デ ィ テ ィ ン グ parts high 16 nt の field が エ デ ィ テ ィ ン グ に important で あ り, さ ら に resistance against competition be 験 に よ っ て こ の field に ト ラ ン ス factor が interaction す る こ と が Ming ら か に な っ た. 16 the nt か ら な る field を ス キ ャ ニ ン グ - different を import し た と こ ろ full て の - different RNA に お い て エ デ ィ テ ィ ン グ anti 応 が up こ ら な か っ た こ と か ら l6nt all important で が あ る こ と が Ming ら か に な っ た. With others in の - different mRNA に よ り in vitro turn 訳 department に よ り psbL mRNA の turn 訳 を suppression field analytical し た results, double 訳 に も high 16 が nt の field で あ る こ と が Ming ら か に な り, エ デ ィ テ ィ ン グ と turn 訳 の シ ス match column が オ ー バ ー ラ ッ プ し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. こ の is を with い る こ と に よ り エ デ ィ テ ィ ン グ factor と turn 訳 factor の order だ っ た mRNA と の interaction institutions が Ming ら か に な る と expect さ れ る. 2. Photosynthetic masato even heritage 伝 son の 発 process で now see ら れ る turn 訳 フ ィ ー ド バ ッ ク institutions を Ming ら か に す る た め に photosynthetic product が exist し な い non photosynthetic culture cell origin の chromatophore extract か ら in vitro turn 訳 started を 発 し た.

项目成果

Masahiro Sugiura: "Evolution and mechanism of translation in chloroplasts" Annual Review of Genetics. 32. 437-459 (1998)

Masahiro Sugiura：“叶绿体的进化和翻译机制”遗传学年度评论。

Tetsuro Hirose: "Translation of tobacco chloroplast upsl4 mRNA depends on a Shine-Dalgarro-like sequerce in the 5'-untransluted region but not on internal RNA editing in the coding region" FEBS Letters. 430. 257-260 (1998)

Tetsuro Hirose：“烟草叶绿体 upsl4 mRNA 的翻译取决于 5-未翻译区域中的 Shine-Dalgarro 样序列，但不依赖于编码区域中的内部 RNA 编辑” FEBS Letters。

Tetsuro Hirose: "The Chloroplast infA gene with a VVG initiation codon" FEBS Letters. 445. 169-172 (1999)

Tetsuro Hirose：“带有 VVG 起始密码子的叶绿体 infA 基因”FEBS Letters。