軟骨細胞分化とイノシトールリン酸代謝に関する研究

软骨细胞分化与磷酸肌醇代谢研究

• 批准号: 10877299
• 负责人: 平田 雅人
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877299/
• 关键词: 軟骨細胞; 細胞分化; イノシトールリン酸; 細胞内情報伝達

イノシトールポリリン酸ホスファターゼ(MIPP)遺伝子が、ニワトリの増殖軟骨細胞層/肥大軟骨細胞層の境界に特異的に発現する遺伝子Band17と極めて類似していた。本研究では、両遺伝子の類似性および軟骨細胞分化におけるイノシトールリン酸代謝系の係わりを明らかにすることを目的とした。6日齢ラット脛骨骨端成長軟骨を用いたinsituhybridization法により、MIPP遺伝子が増殖細胞層から肥大細胞層にかけて強く発現していることを明らかにした。これはBand17遺伝子で示されていた結果と同様であり、両遺伝子の類似性を示唆するものであった。軟骨細胞分化のモデルとして選択したAIDC5細胞をインスリン存在下で培養後、0、2、10、17、21、28、34日の各段階でRNAを調製した。ノーザンブロッティング法によりI型・II型・X型コラーゲン遺伝子発現を調べATDC5細胞の軟骨細胞としての分化段階を推定した。II型コラーゲン遺伝子発現の上昇がみられるインスリン刺激後10日目から、X型コラーゲン遺伝子発現の上昇がみられる17〜21日目にかけてATDC5細胞が軟骨細胞へと分化し、骨端成長軟骨での増殖細胞層/肥大細胞層に相当する段階にあると考えられる。MIPP遺伝子の発現を調べたところ、インスリン刺激前でも発現は認められるものの、刺激後2〜10日にかけて上昇し、その後も刺激前に比較すると高い発現を維持していることが分かった。したがって、モデル細胞株における細胞分化においてもMIPP遺伝子は増殖細胞層/肥大細胞層にかけて発現するものと思われた。軟骨細胞分化過程においてイノシトールリン酸代謝系を介した細胞内情報伝達経路が存在することが予測される。

The expression of MIPP gene is similar to that of MIPP gene, which is specific to the growth chondrocyte layer/hypertrophic chondrocyte layer. The purpose of this study is to clarify the similarity of chondrocytes and chondrocyte differentiation. 6. The growth cartilage of tibia bone end was developed by insituhybridization method, and the MIPP gene was developed by proliferation cell layer and mast cell layer. The results of this study are similar to those of Band17. Chondrocyte differentiation was induced by RNA modulation at different stages of AIDC5 cells on days 0, 2, 10, 17, 21, 28 and 34 after culture. The differentiation stages of chondrocytes in ATDC-5 cells were estimated by using the method of cell differentiation, including type I, type II and type X chondrocytes. The expression of type II and type X protein increased from 10 to 21 days after stimulation. The differentiation of chondrocytes in ATDC-5 cells and the differentiation of osteogenic cartilage/mast cell layer in osteogenic cartilage were studied. MIPP gene expression was modulated and increased before stimulation, 2 ~ 10 days after stimulation, and maintained at a high level before stimulation. The cell differentiation process of MIPP gene and the development process of MIPP gene and mast cell layer are discussed. Chondrocyte differentiation is mediated by an acid metabolism system and the existence of intracellular signaling pathways is predicted.

项目成果

Yagisawa,H., 他: "Replacements of single basic amino acids in the pleckstrin homology domain phospholipase C-δ1 alter the ligand binding,phospholipase activity and interaction with the plasma membrane." J.Biol.Chem.273. 417-424 (1998)

Yagisawa, H. 等人：“pleckstrin 同源结构域磷脂酶 C-δ1 中单个碱性氨基酸的替换改变了配体结合、磷脂酶活性以及与质膜的相互作用。”J.Biol.Chem.273-。 424（1998）

Caffrey,J.J. 他: "Multiple inositol polyphosphate phosphatase:Molecular cloning of the human form of an enzyme in endoplasmic reticulum that is up-regulated during chondrocyte hypertrophy." FEBS Lett.442. 99-104 (1999)

Caffrey, J.J. 等人：“多种肌醇多磷酸磷酸酶：内质网中一种在软骨细胞肥大过程中上调的酶的分子克隆。” FEBS Lett 99-104 (1999)。

Takeuchi,H. 他: "PTB domain of insulin receptor substrate-1 binds inositol compounds." Biochem.J.334. 211-218 (1998)

Takeuchi, H. 等人：“胰岛素受体底物 1 的 PTB 结构域结合肌醇化合物。”Biochem.J.334 (1998)。

Takeuchi,H. 他: "Membrane association of a new inositol 1,4,5-trisphosphate binding protein,p130 is not dependent on the pleckstrin homology domain" Chem.Phys.Lipids.in press. (1999)

Takeuchi, H. 等人：“新型肌醇 1,4,5-三磷酸结合蛋白 p130 的膜关联不依赖于 pleckstrin 同源结构域”Chem.Phys.Lipids.in press (1999)。

Matsuda,M.他: "Localization of a novel inositol 1,4,5-trisphosphate binding protein,p130 in rat brain." Neurosci.Lett.257(2). 97-100 (1998)

Matsuda, M. 等人：“大鼠脑中新型肌醇 1,4,5-三磷酸结合蛋白 p130 的定位。Neurosci.Lett.257(2) (1998)。