植物の大規模ゲノムプロジェクト支援による天然物生合成系の逆遺伝学
植物の大規模ゲノムプロジェクト支援による天然物生合成系の逆遺伝学
批准号:
10878091
负责人:
斉藤 和季
金额:
$1.47万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份:
1998
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1998 至 1999
中文摘要
シロイヌナズナでは、現在までに3種類のセリンアセチル転移酵素SATaseアイソザイムの存在が知られているが、最近4種類目のSATaseをコードするゲノムおよびcDNA配列がデータベース上に報告された。そこでこのSAT106の機能解析を目的として、シロイヌナズナλYES cDNA libraryを用いてPCR法によりcDNAクローンの単離を行った。SAT106は全長約1kbであり、そのC末領域の1次構造はフィードバック阻害感受型、非感受型とは全く異なるタイプを示した。大腸菌発現系を用いた解析の結果、SAT106は大腸菌JM39/5のシステイン要求性を機能的に相補した。分子生物学におけるモデル植物であるシロイヌナズナでは、T-DNA挿入にもとづく変異体のタグラインシステムの整備が進んでおり、目的遺伝子の破壊変異体の分離に利用されている。本研究ではSATase遺伝子破壊変異体の分離を目的として、SAT-c、SAT-p、SAT-mについてスクリーニングを行った。その結果、SAT-cとSAT-mで一つずつラインが見い出された。また、いくつかの生理学的な結果から以前ミトコンドリア性のシステイン合成酵素として同定された蛋白質が、実はβ-シアノアラニン合成酵素ではないかと考えられた。そこでこのcDNAを大腸菌内で発現し、酵素活性測定、β-シアノアラニン合成酵素抗体を用いたイムノブロット分析によって確かに本蛋白質は、システイン合成酵素活性を有するものの実際にはβ-シアノアラニン合成酵素として機能していることを明らかにした。
英文摘要
シロイヌナズナでは、現在までに3種類のセリンアセチル転移酵素SATaseアイソザイムの存在が知られているが、最近4種類目のSATaseをコードするゲノムおよびcDNA配列がデータベース上に報告された。そこでこのSAT106の機能解析を目的として、シロイヌナズナλYES cDNA libraryを用いてPCR法によりcDNAクローンの単離を行った。SAT106は全長約1kbであり、そのC末領域の1次構造はフィードバック阻害感受型、非感受型とは全く異なるタイプを示した。大腸菌発現系を用いた解析の結果、SAT106は大腸菌JM39/5のシステイン要求性を機能的に相補した。分子生物学におけるモデル植物であるシロイヌナズナでは、T-DNA挿入にもとづく変異体のタグラインシステムの整備が進んでおり、目的遺伝子の破壊変異体の分離に利用されている。本研究ではSATase遺伝子破壊変異体の分離を目的として、SAT-c、SAT-p、SAT-mについてスクリーニングを行った。その結果、SAT-cとSAT-mで一つずつラインが見い出された。また、いくつかの生理学的な結果から以前ミトコンドリア性のシステイン合成酵素として同定された蛋白質が、実はβ-シアノアラニン合成酵素ではないかと考えられた。そこでこのcDNAを大腸菌内で発現し、酵素活性測定、β-シアノアラニン合成酵素抗体を用いたイムノブロット分析によって確かに本蛋白質は、システイン合成酵素活性を有するものの実際にはβ-シアノアラニン合成酵素として機能していることを明らかにした。
期刊论文(1)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Chai-Ling Ho, et.al.: "Plastidic Pathway of Serine Biosynthesis"The Journal of Biological Chemistry. 274・16. 11007-11012 (1999)
Chai-Ling Ho 等:“丝氨酸生物合成的质体途径”生物化学杂志 274・16(1999)。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
メタボロミクスを基盤とするシロイヌナズナのゲノム機能科学
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批准号:06F06908
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.66万
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财政年份:2006
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
シロイヌナズナにおけるバイオケミカルパニングとメタボロミクス
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批准号:14658183
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$2.11万
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财政年份:2002
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
アントシアニン生合成における転写調節因子の生物学的多様性:ポストゲノム世代における二次代謝のモデル
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批准号:01F00145
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.92万
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财政年份:2001
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
植物二次代謝における配糖化反応の分子遺伝学的代謝工学
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批准号:00F00348
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.41万
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财政年份:2000
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
植物個体における硫黄同化の分子統御機構の解明
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批准号:11151203
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$3.2万
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财政年份:1999
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
植物細胞における硫黄代謝の分子生物学と生物工学
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批准号:97F00158
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.54万
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财政年份:1998
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
植物個体にける硫黄同化の分子統御機構の解明
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批准号:10170203
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$2.88万
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财政年份:1998
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
植物個体における硫黄同化の分子統御機構の解明
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批准号:09274203
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$3.52万
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财政年份:1997
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
ESTクローンを用いたアラビドプシスの天然物生合成系のリバースジェネティクス
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批准号:08878082
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1996
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
高等植物における硫黄同化に関する遺伝子群の組織化と分子制御
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批准号:07251203
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.41万
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财政年份:1995
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
生合成反応における超分子形成の精密な解析と超天然酵素分子の創製
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批准号:07229205
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.34万
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财政年份:1995
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
生合成反応の遺伝子レベルでの精密な解析と超天然酵素分子の創製
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批准号:06240207
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.41万
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财政年份:1994
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
高等植物における硫黄同化に関する遺伝子群の組織化と分子制御
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批准号:06259203
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.54万
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财政年份:1994
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
高等植物におけるイオウ同化に関する遺伝子群の組織化と分子制御
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批准号:05266205
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.34万
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财政年份:1993
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
Tiプラスミドベクターによる薬理植物ゲノムへの有用外来遺伝子導入
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批准号:01771961
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.51万
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财政年份:1989
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
植物ベクターTiプラスミドによる薬用植物形質転換
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批准号:63771941
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.58万
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财政年份:1988
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
異物の毒性発現に関与する芳香族ヒドロキシルアミンアセチル転移酵素
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批准号:60771934
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.58万
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财政年份:1985
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
薬物N-水酸化と脂質過酸化との相互作用
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批准号:57771524
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.51万
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财政年份:1982
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负责人:斉藤 和季
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依托单位:
海外基金