ESTクローンを用いたアラビドプシスの天然物生合成系のリバースジェネティクス

使用EST克隆的拟南芥天然产物生物合成系统的反向遗传学

基本信息

  • 批准号:
    08878082
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 1997
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

【目的】アントシアニン生合成において、ロイコアントシアニジンからのアントシアニジンの生成反応はアントシアニジン合成酵素(ロイコアントシアニジンジオキシゲナーゼ)(LDOX)により触媒されることが分子遺伝学的に示唆されている。しかし、本酵素の活性をin vitroで検出した例はなく、酸化酵素の他に脱水酵素の存在の可能性等、反応の詳細は明らかとされていない。そこで本研究ではアカジソ葉で特異的に発現するLDOXのcDNAを大腸菌で高発現させて得た組み換え精製タンパク質について、in vitroでの酵素化学的解析を行った。【実験・結果】1.LDOXの発現とアントシアニン含有量の解析LDOOXのNorthern解析並びにWestern解析を行ったところ、LDOXのmRNAとタンパク質はアカジソの葉と茎に特異的に発現していることが示され、これらの発現パターンは各組織のアントシアニン含有パターンに一致した。2.精製タンパク質の酵素化学的解析LDOX cDNAのORF領域を大腸菌高発現ベクターに導入し高発現系を構築した。その結果、発現誘導後の大腸菌抽出液にLDOX活性が確認された。この反応系より二価鉄イオン、アスコルビン酸、または2-オキソグルタル酸を除いた系ではLDOX活性の顕著な減少がみられ、LDOXが2-オキソグルタル酸依存性酸化酵素であることが生化学的に証明された。本組み換えタンパク質を精製し解析を行った結果、精製タンパク質においてもLDOX活性が確認された。このことから、ロイコアントシアニジンからのアントシアニジンの生成には本酵素だけで必要十分であり、特異的な脱水酵素はなくても反応の進行することが明らかとなった。
【 objective 】 ア ン ト シ ア ニ ン biosynthesis に お い て, ロ イ コ ア ン ト シ ア ニ ジ ン か ら の ア ン ト シ ア ニ ジ ン の generated against 応 は ア ン ト シ ア ニ ジ ン synthetase (ロ イ コ ア ン ト シ ア ニ ジ ン ジ オ キ シ ゲ ナ ー ゼ) (LDOX) に よ り catalyst さ れ る こ と が molecules but 伝 learn に in stopping さ れ て い る. を の し か し, the enzyme activity in vitro で 検 out し た example は な く の he に dehydration acidification enzyme and enzyme の is の possibilities, such as anti 応 の detailed は Ming ら か と さ れ て い な い. そ こ で this study で は ア カ ジ ソ leaf で specific に 発 now す る LDOX の cDNA を coliform で high 発 now さ せ て have た group み exchange え refined タ ン パ ク qualitative に つ い て, the in vitro で の enzyme chemistry analytical line を っ た. 【 be 験 · results 】 1. LDOX の 発 now と ア ン ト シ ア ニ ン contain quantity の parsing LDOOX の Northern parse and び に Western analytical line を っ た と こ ろ, LDOX の mRNA と タ ン パ ク qualitative は ア カ ジ ソ の leaf と stem に specific に 発 now し て い る こ と が shown さ れ, こ れ ら の 発 now パ タ ー ン は each The organization <s:1> ア トシアニ トシアニ トシアニ <e:1> contains パタ に に に consistent <s:1> た. 2. Chemical analysis of refined タ パ パ <s:1> plasmid enzyme, LDOX cDNA cdna, ORF field を escherichia coli high occurrence ベ タ <s:1> に に に introduction of <s:1> high occurrence series を construction of た. Youdaoplaceholder0 results, にLDOX activity in the <s:1> escherichia coli extract after induction が confirmation された. こ の anti 応 department よ り two objects 価 iron イ オ ン, ア ス コ ル ビ ン acid, ま た は 2 - オ キ ソ グ ル タ ル acid を except い た department で は LDOX active の 顕 the な reduce が み ら れ, LDOX が 2 - オ キ ソ グ ル タ dependency ル acid acidification enzyme で あ る こ と が biochemistry に prove さ れ た. Change this み え タ ン パ ク qualitative analytical line を っ を refined し た results, refined タ ン パ ク qualitative に お い て も LDOX active が confirm さ れ た. こ の こ と か ら, ロ イ コ ア ン ト シ ア ニ ジ ン か ら の ア ン ト シ ア ニ ジ ン の generated に は this enzyme だ け で very necessary で あ り specific な dehydration and enzyme は な く て も anti 応 の for す る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

斉藤 和季其他文献

イネの雄性生殖器官発達におけるオートファジーの役割
自噬在水稻雄性生殖器官发育中的作用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    陶 文紀;来須 孝光;岡咲 洋三;二平 耕太朗;花俣 繁;小谷野 智子;北畑 信隆;永田 典子;斉藤 和季;朽津 和幸
  • 通讯作者:
    朽津 和幸
漢方薬のケモメトリクス解析: 複数のMS分析から得られた方剤煎液水溶成分の統合フィンガープリントと処方適用「証」の相関解析
中药化学计量分析:多次MS分析获得的中药汤剂水成分综合指纹图谱与处方应用“证明”的相关性分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2018
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    岡田 岳人;峠 隆之;及川 彰;並木 隆雄;山崎 真巳;金谷 重彦;斉藤 和季
  • 通讯作者:
    斉藤 和季
イネの花粉発達過程におけるオートファジーの新たな役割
自噬在水稻花粉发育过程中的新作用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    来須 孝光;陶 文紀;岡咲 洋三;二平 耕太朗;花俣 繁;小谷野 智子;北畑 信隆;小嶋 美紀子;永田 典子;榊原 均;斉藤 和季;多田 雄一;朽津 和幸
  • 通讯作者:
    朽津 和幸
メタボロミクスにおけるデータベースと研究例
代谢组学的数据库和研究实例
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    草野 都;斉藤 和季
  • 通讯作者:
    斉藤 和季
ニンニクとタマネギのシステインスルホキシ ド誘導体群の生合成におけるS-酸化酵素の機能比較
大蒜和洋葱中S-氧化酶在半胱氨酸亚砜衍生物生物合成中的功能比较
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    上羽 利瑛子;上山 正恵;森 直子;小沼 美沙都; 今井 真介;斉藤 和季;吉本 尚子
  • 通讯作者:
    吉本 尚子

斉藤 和季的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('斉藤 和季', 18)}}的其他基金

メタボロミクスを基盤とするシロイヌナズナのゲノム機能科学
基于代谢组学的拟南芥基因组功能科学
  • 批准号:
    06F06908
  • 财政年份:
    2006
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
シロイヌナズナにおけるバイオケミカルパニングとメタボロミクス
拟南芥生化淘选和代谢组学
  • 批准号:
    14658183
  • 财政年份:
    2002
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
アントシアニン生合成における転写調節因子の生物学的多様性:ポストゲノム世代における二次代謝のモデル
花青素生物合成中转录调节因子的生物多样性:后基因组次生代谢模型
  • 批准号:
    01F00145
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
植物二次代謝における配糖化反応の分子遺伝学的代謝工学
植物次生代谢中糖基化反应的分子遗传代谢工程
  • 批准号:
    00F00348
  • 财政年份:
    2000
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
植物個体における硫黄同化の分子統御機構の解明
阐明单个植物硫同化的分子控制机制
  • 批准号:
    11151203
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
植物細胞における硫黄代謝の分子生物学と生物工学
植物细胞硫代谢的分子生物学与生物工程
  • 批准号:
    97F00158
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
植物の大規模ゲノムプロジェクト支援による天然物生合成系の逆遺伝学
大规模植物基因组项目支持的天然产物生物合成系统的反向遗传学
  • 批准号:
    10878091
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
植物個体にける硫黄同化の分子統御機構の解明
阐明单个植物硫同化的分子控制机制
  • 批准号:
    10170203
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
植物個体における硫黄同化の分子統御機構の解明
阐明单个植物硫同化的分子控制机制
  • 批准号:
    09274203
  • 财政年份:
    1997
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
高等植物における硫黄同化に関する遺伝子群の組織化と分子制御
高等植物硫同化相关基因的组织和分子调控
  • 批准号:
    07251203
  • 财政年份:
    1995
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

相似海外基金

シロイヌナズナ、ビート、ダイコン、の抽台抑制機構の解明と抽台抑制剤の開発
拟南芥、甜菜和萝卜抽苔抑制机制的阐明和抽苔抑制剂的开发
  • 批准号:
    23K23534
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
シロイヌナズナ野生系統を用いた耐塩性機構の解明と耐性作物育種への展開
利用拟南芥野生系阐明耐盐机制并开发耐盐作物育种
  • 批准号:
    24KJ2015
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
シロイヌナズナにおける熱活性型レトロトランスポゾンの制御機構の解明
拟南芥热激活反转录转座子调控机制的阐明
  • 批准号:
    24KJ0293
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
シロイヌナズナ側根創始細胞非対称分裂にかかる細胞極性形成の分子機構
拟南芥侧根始祖细胞不对称分裂过程中细胞极性形成的分子机制
  • 批准号:
    24KJ1631
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
シロイヌナズナのミオシンの尾部結合タンパク質に着目した植物細胞内交通網の解明
以拟南芥肌球蛋白尾部结合蛋白为重点的植物细胞内交通网络的阐明
  • 批准号:
    24K09482
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Lateral root formation competence of pericycle and lateral toot primordial formation via intercellular coordination
通过细胞间协调的中柱鞘侧根形成能力和侧根原始形成
  • 批准号:
    23H02502
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
移動性分子による経世代的エピジェネティック伝達の制御機構の解明
阐明移动分子跨代表观遗传传递的控制机制
  • 批准号:
    22KJ3075
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
土壌微生物が産生する化合物によって機能する人工植物ホルモン受容体の開発
开发与土壤微生物产生的化合物发挥作用的人工植物激素受体
  • 批准号:
    22KJ3135
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
上流ORFと偽リボソームタンパク質によるストレスや栄養欠乏に応答した翻訳制御
上游 ORF 和假核糖体蛋白响应应激和营养剥夺的翻译控制
  • 批准号:
    23K05799
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
植物の周期的発現を支える時間依存的な翻訳制御システム
支持植物周期性表达的时间依赖性翻译控制系统
  • 批准号:
    23K05628
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 1.28万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了