DNAワクチンを用いた傍腫瘍性神経症候群のモデル開発とその解析

使用 DNA 疫苗进行副肿瘤性神经综合征的模型开发和分析

• 批准号: 10878142
• 负责人: 和中 明生
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10878142/
• 关键词: DNAワクチン; 傍腫瘍性神経症候群; Mel抗原; 動物モデル; DNA ワクチン; 細胞障害性T細胞; 融合蛋白; Mel-N1; マウス

DNAワクチンは抗原蛋白遺伝子を組み込んだプラスミドDNAを直接皮膚などに注射することによりプラスミドに組み込んだ遺伝子を細胞内で発現させ、できた蛋白に対するCD8+T細胞を活性化させ細胞障害性T細胞を誘導するものである。本研究では傍腫瘍性神経症候群のモデル開発の第一歩として傍腫瘍性神経症候群の原因蛋白として最も頻度の高いMel-N1(別名Hu抗原、Hel-N1)を取り上げ、これを標的とした。Mel-N1はマウス由来の蛋白で正常マウス神経細胞に多量に含まれるRNA結合蛋白であり、これのみを免疫したのでは免疫原性が低い(自己免疫を誘導する必要がある)と考えられる。昨年度はMel-N1をより免疫原性の高いβガラクトシダーゼ蛋白に融合した形で発現させ、Epitope spreading現象を利用してMel-N1に対する細胞性免疫を賦活化させることを目的としたが対照群に比して高いCTL活性を示したものの有意な活性上昇は検出されなかった。これらのマウスでは他覚的に皮膚の異常や行動の異常等は観察されなかった。本年度はさらに活性を上昇させる目的でMel-N1蛋白を細胞性免疫を高める効果が最近報告されているCpGモチーフを含むオリゴヌクレオチドと共にマウスに免疫した。また補助としてホストの免疫反応を高めるGM-CSFを発現ベクターに組み込んだものを同時に免疫した。昨年度のマウスよりも液性免疫は2倍以上高まり、また細胞障害性T細胞も対照群に比して有意に高まった。現在これらのマウスにおいて末梢、中枢神経系の炎症細胞の侵潤の有無、感覚障害の有無を検定している。

DNA antigen protein sub-gene DNA was injected directly into the skin by direct injection of the cytotoxic T-cell vaccine, which is known to be intracellular, CD8+T-activated, and cytotoxic T-cell. In this study, Mel-N1 (alias Hu antigen, Hel-N1) was selected as the most sensitive etiological protein for paroxysmal paroxysmal syndrome. The origin of Mel-N1 protein is normal, the cell contains RNA binding protein, the immunogenicity is low, the immunogenicity is low (self-immunity is necessary). Last year, Mel-N1 immunogenicity was high, β-immunogenicity was high, protein fusion was detected, Epitope spreading was activated by Mel-N1, cellular immunity, activation, cellular immunity, immunogenicity, cellular immunity, cellular immunity, cellular Don't pay attention to other people's money. Make sure that you don't know what to do. Don't wait to see how bad things are. In the current year, we have reported that there is a high level of cellular immunity in terms of Mel-N1 protein and cellular immunity. this year, we have recently reported that there is a high level of cellular immunity in the current year. This year, we have reported that there is a high level of cellular immunity in the current year. In this way, we should make sure that the immune response is high, and that the immune response is high. The immune response is not detected in GM-CSF mice. Last year, the level of liquid immunity was more than 2 times higher, and the cytopathic harmfulness of T cells was higher than that of other animals. At present, the periphery of the disease, the central nervous system, the inflammatory cells invade the disease, and the disease is affected by the disease.

项目成果

Kiryu-Seo, S.et al.: "A sequence-specific splicing activator, tra2beta, is up-requlated in response to nerve injury." Mol Brain Res. 62. 220-223 (1998)

Kiryu-Seo, S.et al.：“序列特异性剪接激活剂 tra2beta 在神经损伤时表达上调。”

Tanno,Y.,T.Mori, et al.: "Localization of huntingtin-interacting protein (hip-2) mRNA in the developing mouse brain."J Chem Neuroanat.. 17. 99-107 (1999)

Tanno,Y.,T.Mori, et al.：“亨廷顿蛋白相互作用蛋白 (hip-2) mRNA 在发育中的小鼠大脑中的定位。”J Chem Neuroanat.. 17. 99-107 (1999)

Kitanaka, J.et al.: "Genomic organization and chromosomal location of a LIM/homeodomain gene, Lhx8." Genomics. 49. 307-309 (1998)

Kitanaka, J.et al.：“LIM/同源域基因 Lhx8 的基因组组织和染色体位置。”

Tojo,M.T.Mori, et al: "Expression of patched, and smoothened genes in the basal cell carcinoma."Pathology International. 49. 687-694 (1999)

Tojo，M.T.Mori 等人：“基底细胞癌中修补和平滑基因的表达。”国际病理学。

Honma Y.,K.Kanazawa,T.et al.: "Identification of a novel gene, OASIS, which encodes for a putative CREB/ATF family transcription factor in the long-term cultured astrocytes and gliotic tissue."Mol Brain Res.. 69. 93-103 (1999)

Honma Y.，K.Kanazawa，T. 等人：“鉴定了一种新基因 OASIS，它编码长期培养的星形胶质细胞和胶质细胞组织中假定的 CREB/ATF 家族转录因子。”Mol Brain Res。