細胞死促進遺伝子DP5の細胞特異的発現による悪性黒色腫治療

通过细胞特异性表达细胞死亡促进基因DP5治疗恶性黑色素瘤

• 批准号: 11140264
• 负责人: 和中 明生
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140264/
• 关键词: DP5; アポトーシス; 悪性黒色腫; 遺伝子治療

悪性黒色腫に代表される皮膚悪性腫瘍の遺伝子治療を目的とし腫瘍細胞に導入した際に効果的に細胞死(アポトーシス)を誘導できる遺伝子としてDP5を選択した。DP5はBcl-2ファミリーの中のBH3ドメインのみを有するアポトーシス促進型のメンバーである。前年までの検討で少なくともIn vitroの系において遺伝子導入を行うと高率にアポトーシスを誘導できること、及びBH3ドメインのみの発現でもアポトーシスを誘導できることを示してきた。本年度は実際に黒色腫細胞をマウスに移植して作成した腫瘍に遺伝子導入を行い腫瘍細胞の退縮効果、生存促進効果があるか否かを検討した。またDP5に細胞死誘導効果を制御する因子群をYeast Two Hybrid法を用いて探索した。結果として電気穿孔法を用いたDP5遺伝子導入で対照群に比し有意な腫瘍縮小効果が認められた。しかしながらBH3ドメイン遺伝子導入では有意差は認められなかった。また生存促進効果については両者ともに有意な効果は認められなかった。Yeast Two Hybrid法によるスクリーニングでは3種類の陽性クローンが得られ、そのうちの一種類であるhnRNPは哺乳類細胞に共発現させた場合もDP5と相互作用することが明らかとなった。DP5によるアポトーシスの誘導は培養細胞に比べると低いが、導入効率を考えると妥当な値である。Bcl-2のアンチセンス遺伝子導入がやはり悪性黒色腫の細胞死誘導に効果的であったとの報告が最近なされており、特にBcl-2ファミリーが腫瘍において強発現しているMclanoma細胞などはこのファミリーを標的とした遺伝子治療が有望ではないかと考えられている。今後の課題として導入効率の上昇と他の細胞株を用いた検討が必要である。

The expression of the gene for the treatment of skin cancer is mainly due to the induction of the gene for the treatment of skin cancer. DP5 is a BH3 gene promoter in Bcl-2. In the past year, the number of cases in which the virus was introduced into the vitro system has increased, and the number of cases in which the virus was introduced into the vitro system has increased. This year, we have been investigating the effects of cell transplantation and cell survival promotion. Yeast Two Hybrid method is used to explore the factors that control cell death. The results showed that the DP5 gene was introduced into the target group by electroporation, and the target group was smaller than that of the target group. The introduction of the gene is not intended to be different.また生存促进効果については両者ともに有意な効果は认められなかった。Yeast Two Hybrid method: three kinds of positive reactions, two kinds of positive reactions, two kinds of positive DP5 is the best choice for cell culture. Bcl-2 gene transfer is expected to result in cell death induction in melanoma cells. Recently, Bcl-2 gene transfer has been reported. The problem of increasing the rate of introduction of other cell lines is the need for further research.

项目成果

Imaizumi,K.,Morihara,T., et al.: "The Cell Death-promoting Gene DP5, Which Interacts with the BCL2 Family. Is Induced during Neuronal Apoptosis Following Exposure to Amyloid beta Protein."J Biol Chem. 274. 7975-7981 (1999)

Imaizumi,K.、Morihara,T. 等人：“细胞死亡促进基因 DP5 与 BCL2 家族相互作用。在暴露于淀粉样蛋白 β 蛋白后的神经元凋亡过程中被诱导。”J Biol Chem。

Honma, Y. , Kiyosawa, H. et al: "Eos : a novel member of the Ikaros gene family expressed predominantly in the developing nervous system"FEBS Lett. 447. 76-80 (1999)

Honma, Y.、Kiyosawa, H. 等人：“Eos：Ikaros 基因家族的一个新成员，主要在发育中的神经系统中表达”FEBS Lett。

Tanno, Y. , Mori, et al: "Localization of huntingtin-interacting protein (hip-2) mRNA in the developing mouse brain"J Chem Neuroanat. 17. 99-107 (1999)

Tanno，Y.，Mori 等人：“亨廷顿蛋白相互作用蛋白 (hip-2) mRNA 在发育中的小鼠大脑中的定位”J Chem Neuroanat。

Honma Y.,K.Kanazawa,T.et al.: "Identification of a novel gene, OASIS, which encodes for a putative CREB/ATF family transcription factor in the long-term cultured astrocytes and gliotic tissue."Mol Brain Res.. 69. 93-103 (1999)

Honma Y.，K.Kanazawa，T. 等人：“鉴定了一种新基因 OASIS，它编码长期培养的星形胶质细胞和胶质细胞组织中假定的 CREB/ATF 家族转录因子。”Mol Brain Res。

Tojo, M. T. Mori, et al: "Expression of patched, and smoothened genes in the basal cell carcinoma"Pathology Intemational. 49. 687-694 (1999)

Tojo, M. T. Mori 等人：“基底细胞癌中修补和平滑基因的表达”国际病理学。