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大脳皮質の臨界期を制御する新規プロテオグリカン類の同定と機能解析

大脳皮質の臨界期を制御する新規プロテオグリカン類の同定と機能解析
控制大脑皮层关键期的新型蛋白多糖的鉴定及功能分析
批准号：
21650085
负责人：
和中 明生
金额：
$1.98万
依托单位：
Nara Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2009 至 2010
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21650085/
关键词：
コンドロイチン硫酸マススペクトロスコピーレクチカンアフィニティー精製テネイシンR大脳皮質プロテオグリカン細胞外基質臨界期

项目摘要

项目成果

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昨年度の実験で,大脳皮質の臨界期を過ぎたところから出現する特徴的な細胞外基質であるDACSを構成していると想定されるコンドロイチン硫酸プロテオグリカンの精製は当初の精製プロトコールでは最終的なマススペクトロメトリーに供するだけのタンパク量が確保出来ないことが実験を進める過程で判明した。本年度は精製プロトコールを改良し,スタートするマウス大脳皮質の量を増加させると共に精製のステップをより効率の良いものに変更することにした。具体的には尿素を用いてマウス20匹分の大脳皮質を可溶化し、これを40%、60%の2段階の硫安沈殿を行い透析処理を行った後にDEAEセファロースを用いた精製(ここまではオリジナルプロトコールとほぼ同じ)を経た後に銅キレートカラムを用いた蛋白濃縮を行い、さらにハイドロキシアパタイトカラムの精製を行った。このあとコンドロイチナーゼ処理した標品をマススペクトロスコピーに供した。マス解析ではいわゆるレクチカンファミリーに属するブレビカンやフォスファカンに加えて,分泌型の糖蛋白であるテネイシンRが同定された。テネイシンRの成熟脳での機能的意義が不明であることもあり,同蛋白がDACSを構成している可能性についてインサイチュハイブリダイゼーションとCS56免疫組織化学の二重染色によって検証した。DACSの中心に位置するアストロサイトにテネイシンRのmRNAが高率に発現していることが明らかとなった。
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科研奖励(0)
会议论文
Signalling mediated by the endoplasmic reticulum stress transducer OASIS is involved in bone formation
DOI： 10.1038/ncb1963
发表时间： 2009-10-01
期刊： NATURE CELL BIOLOGY
影响因子： 21.3
作者： [Murakami, Tomohiko, Saito, Atsushi, Imaizumi, Kazunori]
通讯作者： Imaizumi, Kazunori
Chondroitin sulfate demarcates astrocytic territories in the mammalian cerebral cortex
DOI： 10.1016/j.neulet.2010.07.064
发表时间： 2010-10-08
期刊： NEUROSCIENCE LETTERS
影响因子： 2.5
作者： [Horii-Hayashi, Noriko, Tatsumi, Kouko, Wanaka, Akio]
通讯作者： Wanaka, Akio
Olanzapine increases cell mitotic activity and oligodendrocyte-lineage cells in the hypothalamus
DOI： 10.1016/j.neuint.2010.07.003
发表时间： 2010-11
期刊： Neurochemistry International
影响因子： 4.2
作者： [Takahira Yamauchi;K. Tatsumi;M. Makinodan;S. Kimoto;M. Toritsuka;H. Okuda;T. Kishimoto;A. Wanaka]
通讯作者： Takahira Yamauchi;K. Tatsumi;M. Makinodan;S. Kimoto;M. Toritsuka;H. Okuda;T. Kishimoto;A. Wanaka
Increased vulnerability of hippocampal pyramidal neurons to the toxicity of kainic acid in OASIS-deficient mice
DOI： 10.1111/j.1471-4159.2009.06188.x
发表时间： 2009-08-01
期刊： JOURNAL OF NEUROCHEMISTRY
影响因子： 4.7
作者： [Chihara, Kazuyasu, Saito, Atsushi, Imaizumi, Kazunori]
通讯作者： Imaizumi, Kazunori
共 8 条
    真皮マクロファージにおける新規の炎症疼痛制御因子の機能解析
    • 批准号：
      21K06758
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
    • 资助金额：
      $2.58万
    • 财政年份：
      2021
    • 负责人：
      和中 明生
    • 依托单位：
      Nara Medical University
    前脳基底部コリン作動性神経特異的コンディショナルノックアウトマウスの作成と解析
    • 批准号：
      16015296
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $2.5万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      和中 明生
    • 依托单位：
      Nara Medical University
    前脳基底部コリン作動性神経特異的ノックアウトマウスにおける学習記憶異常
    • 批准号：
      15016093
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $2.69万
    • 财政年份：
      2003
    • 负责人：
      和中 明生
    • 依托单位：
      Nara Medical University
    グリオーシス現象の分子基盤-老化,損傷,変性神経の効果的再生を目指して-
    • 批准号：
      12210121
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
    • 资助金额：
      $0.0万
    • 财政年份：
      2000
    • 负责人：
      和中 明生
    • 依托单位：
      Fukushima Medical University
    海外基金