内因性および外因性配位子を持つニトロシル鉄錯体・蛋白質の生体内生成機構

内源性和外源性配体亚硝酰铁配合物和蛋白质的体内生产机制

• 批准号: 11116231
• 负责人: 吉村 哲彦
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Yamagata Public Corporation For the Development Of Industry, Institute Life Support Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11116231/
• 关键词: 一酸化窒素; 生体内一酸化窒素; トラップ; ニトロシル鉄錯体; 電子スピン共鳴; ジチオカルハメート; ジニトロシル鉄錯体

生体内で産生されたNOを結合した単純な構造を持つニトロシル非ヘム鉄錯体が2種類知られている。一方は、NOを2個、チオレートを2個配位したdinitrosyl dithiolato iron complex(DNIC)であり、特徴的な電子スピン共鳴(EPR)スペクトルを示すことが知られている。マクロファージ中で生成されたNOは、アコニターゼ等の鉄一硫黄蛋白質と反応して、活性を阻害し、DNICに起因するEPRスペクトルを示すことが報告されている。また、DNICはNOの生理的なcarrier moleculeまたはdonor moleculeとして機能していることも報告されているが、その構造や性質および生体内における動態等は明らかにされていない。他方は、NOを1個配位したmononitrosyl iron complex(MNIC)で、ジチオカルバメート鉄(Fe-DTC)錯体を生体内NOの捕捉試薬として使用した場合にin vivoおよびin vitroで生成される。このMNICも特徴的なEPRスペクトルを示すので、Fe-DTC錯体は有用なNO分析試薬として多用されているが、捕捉機構については不明な点が残されている。1.グルタチオンを含むDNIC(DNIC-(GS)2)を合成し、得られたDNICの体内挙動をin vivo EPR法により検討した。その結果、(1)DNIC-(GS)2は血液中より速やかに肝臓・腎臓へ移行した後、長時間安定に存在した。臓器のEPRスペクトルは、DNIC-(GS)2が組織中で構造変化することを示唆していた。この構造変化は、DNIC-(GS)2中のGS-が生体内で低分子のチオール類またはタンパク中のチオールと置換することによると考えられる。(2)生きているマウスを対象としたin vivo EPR測定によって、DNIC-(GS)2の上腹部への集積がリアルタイムに観測された。(3)DNIC-(GS)2はマウスの生体内でFe-DTC錯体にNOを供与することが明らかとなった。この結果は、生体内で産生されるDNICが、金属酵素・金属蛋白質をNOアクセプターとしてNO基を供与することを示唆している。2.Fe-DTC錯体による生体内NOの捕捉・検出を試みた。(1)脳内のNOをFe-DTC錯体を用いて捕捉することに成功した。(2)血管拡張薬投与により生体内で産生されるNOをFe-DTC錯体によって検出し、画像化した。3.NOトラップ試薬としてのFe-DTC錯体の生体内NO捕捉機構には新規な還元ニトロシル化反応の関与が明らかとなった。

NO is produced in vivo, and the structure is pure. There are two kinds of NO in vivo. One side, NO, 2, 2 coordination dinitrosyl dithiolato iron complex(DNIC), characteristic electron resonance (EPR), is shown. The production of NO, NO DNIC is a biological carrier molecule of NO, a donor molecule, a functional molecule, a structural molecule, a property, a dynamic molecule, etc. NO is a ligand of mononitrosyl iron complex(MNIC), which is used to capture NO in vivo and in vitro. The MNIC characteristic EPR is displayed on the screen, Fe-DTC is used for NO analysis, and the capture mechanism is used for unknown points. 1. The synthesis of DNIC(DNIC-(GS)2) in vivo was studied by EPR method. The results showed that (1)DNIC-(GS)2 was stable for a long time after rapid migration of liver and kidney in blood. The EPR of the device is divided into two parts: DNIC-(GS)2 and DNIC-(GS)2. The structural transformation of DNIC-(GS)2 in the GS-2 in vivo, low molecular weight, low molecular weight, low molecular weight (2)In vivo EPR assay, DNIC-(GS)2 was used to collect data. (3)DNIC-(GS)2 is the best choice for Fe-DTC in vivo. The results showed that DNIC, metalloenzymes and metalloproteins were produced in vivo. 2.Fe-DTC error detection and NO capture in vivo. (1)NO in the system is captured successfully. (2)NO is produced in the blood vessel and in the organism. 3. NO capture mechanism in vivo of Fe-DTC complex

项目成果

K.Inoue: "Nitrosothiol formation catalyzed by ceruloplasmin"J. Biol. Chem, 274, 27069-27075(1999).. 2745. 27069-27075 (1999)

K.Inoue：“铜蓝蛋白催化亚硝基硫醇的形成”J。

吉村哲彦: "生体内NOの化学"血圧. 6. 471-477 (1999)

Tetsuhiko Yoshimura：“体内 NO 的化学”血压。6. 471-477 (1999)

Y.Suzuki: "Direct evidence of in vivo nitric oxide production and inducible nitric oxide synthase mRNA expression in the rat brain of living rat during experimental meningiris"J. Cereb. Blood Flow Metab.. 19. 1175-1178 (1999)

Y.Suzuki：“实验性脑膜炎期间活体大鼠脑中一氧化氮产生和诱导型一氧化氮合酶 mRNA 表达的直接证据”J.

S.Fujii: "A new trend in iron-dithiocarbamate complexes : As an endogenous NO trapping agent"Coordin. Chem. Rev.. (印刷中). (2000)

S.Fujii：“铁-二硫代氨基甲酸盐复合物的新趋势：作为内源性 NO 捕获剂”Coordin Rev.（出版中）。

T.Ueno: "The physiological activity and in vivo distribution of dinitrosyl dithiolato iron complex"Jpn.J.Pharmacol.. 82. 95-101 (2000)

T.Ueno：“二亚硝基二硫醇铁络合物的生理活性和体内分布”Jpn.J.Pharmacol.. 82. 95-101 (2000)