発癌における内因性活性酸素によるDNA損傷の役割

内源性活性氧引起的 DNA 损伤在癌变中的作用

• 批准号: 11138260
• 负责人: 美野輪 治
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11138260/
• 关键词: 活性酸素; MutM; MMH; OGG1; 8-OH-G; ジーンターゲテイング; ゲノムDNA

[目的]活性酸素は、好気的代謝を行う細胞内で種々の代謝経路を経て生じるが、高反応性で毒性が強く、特に、細胞のゲノムDNAに対して変異原性を示すため、高等脊椎動物における発癌の重要な要因の一つと信じられている。しかしながら、活性酸素が生体中で実際に癌を引き起こす事を直接示す実験は、ほとんど知られていない。ゲノムの安定性を脅かす変異原性要因は多様であり、それによって生じるDNA損傷も多様であるので、こうしたDNA損傷に対処する修復系も必然的に多岐にわたる。ゲノムDNAを変異から守るためには、活性酸素によるDNA傷害を修復する酵素の存在が知られている。MMH(MutM homolog)/OGG1は、活性酸素による主要なDNA損傷である8-oxo-guanine(8-OH-G)特異的に認識し修復する酵素であり、塩基除去修復を行うグループに属する。そこで、このMMHの遺伝子が欠損したマウスにおいて、活性酸素による損傷の増大と発癌性の亢進が観察されれば、癌抑制遺伝子に対する生体中での変異導入の経路を初めて直接示すモデルとなる事が期待される。[方法]標的遺伝子組換え法により、Mmh欠損マウスを得た。諸臓器によりgenomic DNAを抽出し、Electro-chemical detectorにより溶出patternを検出するHPLCを用いて、8-OH-dGの定量を行った。[結果]これらのマウスにおけるゲノムDNA中の8-OH-Gの蓄積について検討したところ、9週齢のホモ接合で野性型に比べ体明瞭な8-OH-Gの上昇が認められた。一方、ヘテロ接合体は、野性型とほぼ同じ値を示し、上昇は認められなかった。これらの結果は、マウスの生体中でgenomic DNAが、常時、内因性の酸化的傷害要因にさらされており、Mmhが実際に酸化的塩基傷害の主要産物である8-OH-Gを修復する酵素である事を示している。

[Purpose] The metabolism of active acid, good metabolism, intracellular metabolism, high reaction resistance, toxicity, strong, special, and fine Cellular DNA heterogeneity is an important factor in cancer of higher vertebrates. The しかしながら and the active acid が in the body are caused by the で実interior cancer and the こす事を are directly indicated by the す実験は and the ほとんど知られていない.ゲノムのStability and risk かす変The main cause of heterogeneity は多様であり、それによって生じるDNA damage It is inevitable that DNA damage will be repaired if it is damaged.ゲノムDNA を変iso からkeeper るためには, active acid によるDNA damage をrepair するenzyme のknow られている. MMH(MutM homolog)/OGG1は、activated acid によるmain DNA damage である8-oxo-guani ne(8-OH-G) specific にcognition repair enzyme であり, hydroxyl group removal repair を行 うグループに genus する.そこで, このMMHの伝子が无码したマウスにおいて, Activated acid による Damage の Increase と発 Cancerous の Observationされれば, cancer-suppressing legacy に対する in the body's での変divergence introduction の経路 をInitial めて directly indicates すモデルとなる事が される. [Method] The underlying subgroup is changed to え法により, Mmh is missing マウスを得た. Various methods are used for genomic DNA extraction, electro-chemical detectors are used for dissolution patterns, HPLC is used, and 8-OH-dG is used for quantification. [Result] The accumulation of 8-OH-G in the DNA of the これらのマウスにおけるゲノムDNAたところ, 9 weeks of 颢のホモjoined the wild type に than the body clearly な8-OH-G のrise が recognized められた. One side, ヘテロ joint body は, wild type とほぼ同じ値をshow し, rising は recognized められなかった.これらのRESULTは、マウスの生中でnomic Damage factors of DNA が, constant, endogenous acidification にさらされており, Mmh acidification The main product of hydroxyl damage is the 8-OH-Gをrepair enzyme, the enzyme である事をshows している.