発癌における内因性活性酸素によるDNA損傷の役割

内源性活性氧引起的 DNA 损伤在癌变中的作用

• 批准号: 11138260
• 负责人: 美野輪 治
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11138260/
• 关键词: 活性酸素; MutM; MMH; OGG1; 8-OH-G; ジーンターゲテイング; ゲノムDNA

[目的]活性酸素は、好気的代謝を行う細胞内で種々の代謝経路を経て生じるが、高反応性で毒性が強く、特に、細胞のゲノムDNAに対して変異原性を示すため、高等脊椎動物における発癌の重要な要因の一つと信じられている。しかしながら、活性酸素が生体中で実際に癌を引き起こす事を直接示す実験は、ほとんど知られていない。ゲノムの安定性を脅かす変異原性要因は多様であり、それによって生じるDNA損傷も多様であるので、こうしたDNA損傷に対処する修復系も必然的に多岐にわたる。ゲノムDNAを変異から守るためには、活性酸素によるDNA傷害を修復する酵素の存在が知られている。MMH(MutM homolog)/OGG1は、活性酸素による主要なDNA損傷である8-oxo-guanine(8-OH-G)特異的に認識し修復する酵素であり、塩基除去修復を行うグループに属する。そこで、このMMHの遺伝子が欠損したマウスにおいて、活性酸素による損傷の増大と発癌性の亢進が観察されれば、癌抑制遺伝子に対する生体中での変異導入の経路を初めて直接示すモデルとなる事が期待される。[方法]標的遺伝子組換え法により、Mmh欠損マウスを得た。諸臓器によりgenomic DNAを抽出し、Electro-chemical detectorにより溶出patternを検出するHPLCを用いて、8-OH-dGの定量を行った。[結果]これらのマウスにおけるゲノムDNA中の8-OH-Gの蓄積について検討したところ、9週齢のホモ接合で野性型に比べ体明瞭な8-OH-Gの上昇が認められた。一方、ヘテロ接合体は、野性型とほぼ同じ値を示し、上昇は認められなかった。これらの結果は、マウスの生体中でgenomic DNAが、常時、内因性の酸化的傷害要因にさらされており、Mmhが実際に酸化的塩基傷害の主要産物である8-OH-Gを修復する酵素である事を示している。

[Objective] Active acids metabolize well and metabolize well. Metabolic pathways in cells are highly reactive, toxic, and specific. Cellular DNA is an important factor in cancer development in higher vertebrates. The active acid in the organism causes cancer and is directly indicated in the body. The stability of DNA is threatened by heterogeneities due to the diversity of DNA damage and the diversity of DNA repair systems. The presence of DNA damage repair enzymes is known. MMH(MutM homolog)/OGG1 is an enzyme that recognizes and repairs major DNA damage caused by 8-oxo-guanine(8-OH-G)-specific enzymes, such as active acids and enzymes that remove DNA bases. In this case, the MMH gene is deficient, damaged, increased, cancerous and hyperactive, and the cancer suppressor gene is directly involved in the pathway of heterogenesis in the organism. [Method] Target sub-group change method Genomic DNA extraction, Electro-chemical detector, dissolution pattern detection, HPLC, 8-OH-dG quantification [Results] The accumulation of 8-OH-G in DNA of 9-week-old and 9-week-old hybrids was significantly higher than that of wild hybrids. A party, a wild type, a wild type, a wild type. As a result, 8-OH-G repair enzymes are shown to be responsible for the damage caused by genomic DNA, chronic and endogenous acidification in organisms, as well as for the damage caused by Mmh and chronic acidification.